兔骨骼肌原代细胞

培养信息：

包被条件 PLL（0.1mg/ml）

培养基 含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等

换液频率 每2-3天换液一次

生长特性 贴壁

细胞形态 成纤维细胞样

传代特性 可传2-3代

消化液 0.25%

培养条件 气相：空气，95%；CO2，5%

兔骨骼肌细胞分离自四肢肌肉组织；骨骼肌又称横纹肌，肌肉中的一种，约占全身重量的40%。骨骼肌纤维为长柱形的多核细胞，肌膜的外面有基膜紧密贴附。属于横纹肌，横纹肌还包括心肌与内脏横纹肌，其中骨骼肌主要分布于四肢。每块肌肉都是具有一定形态、结构和功能的器官，有丰富的血管、淋巴分布，在躯体神经支配下收缩或舒张，进行随意运动。肌肉可根据共形状、大小、位置、起止点、纤维方向和作用等命名。依形态命名的如斜方肌、菱形肌、三角肌、梨状肌等。骨骼肌细胞呈纤维状，不分支，有明显横纹，核很多，且都位于细胞膜下方。肌细胞内有许多沿细胞长轴平行排列的细丝状肌原纤维。每一肌原纤维都有相间排列的明带（Ⅰ带）及暗带（A带）。明带染色较浅，而暗带染色较深。暗带中间有一条较明亮的线称H线。H线的中部有一M线。明带中间，有一条较暗的线称为Z线。两个Z线之间的区段，叫做一个肌节。骨骼肌细胞也称横纹肌细胞，细胞呈纤维状，不分支，有明显横纹，核很多，且都位于细胞膜下方，细胞多呈梭行，具有一定的方向性。骨骼肌细胞原代分离培养3天后，可见细胞贴壁伸展，细胞形态大小不一，呈梭形、不规则形、三角形或扇形，核卵圆形、居中；2周后细胞汇合，多数细胞伸展呈长梭形，胞浆丰富，有分枝状突起，细胞平行排列成单层或部分区域多层重叠生长，高低起伏；细胞密度低时，常交织成网状；密度高时，则排列为旋涡状或栅栏状。传代后细胞生长较快，4-6天即可汇合，并保持上述形态学特征和生长特点。

方法简介：

公司实验室分离的兔骨骼肌细胞采用胶原酶消化法制备而来，细胞总量约为5×10?cells/瓶。

质量检测：

公司实验室分离的兔骨骼肌细胞经α-Sarcometric actin免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。

① 组织块培养法

　　组织块培养是常用、简便易行和成功率较高的原代培养方法。其基本方法是将剪成的小组织团块接种于培养瓶(或皿)中，瓶壁可预先涂以胶原薄层，以利于组织块粘着于瓶壁，使周边细胞能沿瓶壁向外生长。

　?、?消化培养法

　?、?悬浮细胞培养法

　　对于悬浮生长的细胞，如白血病细胞、淋巴细胞、骨髓细胞、胸水和腹水中的癌细胞和免疫细胞无需消化，可采用低速离心分离，直接培养，或经淋巴细胞分层液分离后接种培养。

　?、芷鞴倥嘌?/p>

　　器官培养是指从供体取得器官或组织块后，不进行组织分离而直接在体外的特定环境条件下培养，器官培养可保持器官组织的相对完整性，可用于重点观察细胞间的联系、排列情况和相互影响，以及局部环境的生物调节作用。

CROT Others Human 人 CROT (474 Leu/Val) 杆状病毒-昆虫细胞裂解液   NCI-H1650(人非小细胞肺癌细胞)     CL-0097HCT-15(人结肠癌细胞)  杂交瘤(B类);Z153A2A5B3A12 小鼠原代三叉神经元细胞 兔原代三叉神经星形胶质细胞

CT (Calcitonin 0.5mgCT (Calcitonin ) 降钙素(抗原)

H1F0 Protein Human 重组人 H1F0 / Histone H1 蛋白

CD63重组大鼠 CD63 / Tspan-30 / Tetraspanin-30 蛋白 (Fc 标签) Protein

PCSK9 Protein Mouse 重组小鼠 PCSK9 / NARC1 蛋白

FCER2重组人 CD23 / FCER2 蛋白 Protein

大鼠组胺H3受体(HRH3)试剂盒 ，英文名： HRH3 ELISA Kit

Mouse ai sperm aibody (AsAb) ELISA Kit 小鼠抗抗体(AsAb)试剂盒

Mouse8-Hydroxy-desoxyguanosine,8-OHdGELISAKit 小鼠8羟基脱氧鸟苷(8-OHdG)试剂盒 96T/48T 进口分装

CLIAKitforHumanlymphocytefactorELISAKit人淋巴细胞因子

土壤(lithium)化学比色法定量试剂盒50次

ELISAKitdsDNA大鼠抗双链DNA抗体/天然DNA抗体

小鼠膜联蛋白Ⅴ(ANX-Ⅴ)试剂盒   96T/48T

小鼠苗条素受体(LR/Ob-R)试剂盒   96T/48T

小鼠免疫球蛋白M(IgM)试剂盒   96T/48T

小鼠免疫球蛋白G(IgG)试剂盒   96T/48T

兔骨骼肌原代细胞豚鼠内皮素1(EDN1)试剂盒 ，英文名： EDN1 ELISA Kit

Human parathyroid hormone related peptide (PTHrp) ELISA Kit 人副甲状旁腺激素相关肽(PTHrp)试剂盒

rabbitImmunoglobulinA,IgAELISAKit 兔子免疫球蛋白A(IgA)试剂盒 96T/48T 进口分装

CLIAKitforBALP(Humanbonealkalinephosphatase)ELISAKit人骨碱性0酸酶

线虫β-半乳糖苷酶化学发光定量试剂盒20次

RabbitcoagulationfactorⅡ,FⅡELISAKit兔子Ⅱ(FⅡ)试剂盒规格：96T/48T

MCAM重组人 CD146 / MCAM 蛋白 Protein

乙酰羧化酶α(ACACα)重组蛋白 Recombinant Acetyl Coenzyme A Carboxylase Alpha (ACACa)

HA重组甲型流感 H1N1 (A/WSN/1933) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 蛋白 Protein

HAVCR1 Protein Human 重组人 KIM-1 / TIM1 / HAVCR1 蛋白 (His & Fc 标签)

GST Protein Schistosoma japonicum 重组日本血吸虫 Glutathione S-transferase / GST 蛋白

客户收到细胞后，请按照以下方法进行操作。(该细胞传代次数有限约 2 代，建议客户收到细胞后尽快安排后续实验)

1、取出细胞瓶，75%酒精消毒后拆下封口膜，放入 37℃，5%CO2 培养箱中静置 6-8 小时，以稳定细胞状态。

2、待细胞达到 80%汇合时准备进行传代培养。

3、细胞传代：

1)吸出细胞瓶中的培养基，用 PBS 清洗细胞一次。

2)加入 0.125%消化液约 1mL 至培养瓶中，37℃消化 3min 左右；显微镜下观察，待细胞回缩变圆后吸弃消化液，再加入培养液终止消化。

3)用吸管轻轻吹打混匀，按 1:2 或 1:3 等适当的比例进行接种传代，然后补充新鲜的培养基至 5mL，放入 37℃ 5% CO2 细胞培养箱中培养。

4)待细胞贴壁后，培养观察，每隔 2-3 天更换新鲜的培养基。