详细介绍
以下是细胞生物学试剂的详细介绍:
中文名称 | 英文名称 | 产品规格 | 发货周期 |
500μl | 1~3天 |
商品介绍:
DIOC16(3)PERCHLORATE 细胞膜染色试剂为绿色荧光标记的细胞膜探针,具有488 / 500nm的大激发/发射波长。 当亲脂性的绿色荧光探针DIOC16(3)PERCHLORATE 进入细胞膜后,在整个细胞膜上扩散,佳浓度时可以使整个细胞膜染色。染色液DIOC16(3)PERCHLORATE在进入细胞膜之前荧光非常弱,当与细胞膜结合后其荧光强度大大增强,被激发后可以发出绿色的荧光,具有很高的淬灭常数和激发态寿命。 荧光探针DIOC16(3)PERCHLORATE 通常不会明显影响细胞的活力,因此被广泛用于正向或逆向的,活的或固定的神经等细胞或组织的示踪剂。除了简单的细胞膜荧光标记外,还可以用于检测细胞的融合和粘附,检测发育或移植过程中细胞迁移,通过FRAP(Fluorescence Recovery After Photobleaching)检测脂在细胞膜上的扩散,检测细胞毒性和标记脂蛋白等。 细胞膜探针具有多种颜色可以选择,可根据情况对样品进行多色标记实验。除了本试剂盒的绿色荧光探针,我公司还可以提供红色、橙色、深红色等颜色的染色试剂盒。 以96孔板每孔200μl染色液计,本试剂盒小包装可以染色1000-5000个样本。 储存条件:染料-20℃避光保存;避免反复冻融。 有效期:六个月。 |
公司产品仅用于科研细胞培养操作规程:
一.培养基及培养冻存条件准备:
1)准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640:GIBCO),90%;优质胎牛血清,10%。
2)培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37℃,培养箱湿度为70%-80%。
3)冻存液:90%血清,10%DMSO,现用现配,液氮储存。
二.细胞处理:
1)复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于冻存管盖部)摇晃解冻,移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。
2)细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。
对于悬浮细胞,传代可参考以下方法:
方法一:收集细胞,1000RPM,常温条件下离心5分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀,将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
操作步骤:
1. 样品染色
1) 将Binding Buffer(10×)稀释成1×Binding buffer工作液备用(1ml Binding Buffer(10×)需加入9ml无菌去离子水)。
2) 对于悬浮细胞,500-1000g离心5min收集细胞。
对于贴壁细胞,要用不含EDTA的胰酶消化细胞,胰酶消化时间不宜过长或过短,最好是在轻轻吹打可以使贴壁细胞吹打下来时,加入细胞培养液,将细胞轻轻吹打下来,转移到离心管内,500-1000g离心5min收集细胞。
3) 收集细胞后,加入预冷PBS溶液轻摇或用移液器轻柔吹打洗涤,离心收集细胞,共洗涤两次。
4) 在细胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液,重悬细胞,使细胞浓度达到1×106 cell/ml。
5) 吸取100μl细胞悬液(细胞总数为1×105 cell)至一新管中,加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI,轻轻混匀,室温避光孵育15min。
2. 样品检测
1) 流式细胞仪检测:
染色孵育后,每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液,混匀后使用流式细胞仪检测(1小时内检测)。
建议设置经凋亡诱导的正常细胞、PI单染和Annexin V-FITC单染3个对照组,正常细胞组可作为荧光补偿调节去除光谱重叠和设定十字门的位置。结果可用CellQuest等软件进行分析,绘制双色散点图(two-color dot plot),FITC为横坐标,PI为纵坐标。Annexin V-FITC和PI联合使用时,活细胞仅有很低强度的背景荧光,早期凋亡细胞仅有较强的绿色荧光,晚期凋亡细胞有绿色和红色双重荧光。
2) 荧光显微镜检测:
染色孵育后涂片,显微镜下观察。使用荧光显微镜上的蓝光和绿光通道分别观察FITC和PI。被Annexin V-FITC结合的细胞显示浆膜上有绿色光环。丧失细胞膜完整性的细胞,细胞核显示红色,膜上有绿色光环。
绿绒蒿(标准品)英文名称: Molecular sieves, 5 ?葡萄糖转运蛋白3抗体包装25g
绿原(标准品)英文名称: Kaolin凝溶胶蛋白抗体包装5g
化两面针碱(标准品)英文名称: Kaolin(superfine)生长激释放激抗体包装1g
化木兰花碱(标准品)英文名称: Kaolin(superfine)胶质纤维性蛋白抗体包装5g
化矢车菊,花青(标准品)英文名称: Kaolin(superfine)绿色荧光蛋白(免疫组化用抗体)包装25g
化缬草英文名称: Kaolin(superfine)生长激受体抗体包装5g
化血根碱(标准品)英文名称: Kaolin脑肠肽抗体包装1g
轮环藤根(标准品)英文名称: Kieselguhr G糖蛋白A33抗体包装5g
罗布麻宁;香草乙;夹竹桃麻(标准品)英文名称: Silica gel脑肠肽抗体包装1g
罗布麻叶(标准品)英文名称: Silicon dioxide胰高血糖样肽-2抗体包装5g
罗汉果(标准品)英文名称: SandG蛋白偶联受体GPR114蛋白抗体包装100g
罗汉果苷III(标准品)英文名称: Sand胶质源性连接蛋白抗体包装25g
罗汉果苷IV(标准品)英文名称: Ammonium phosphate monobasic糖蛋白VI/六糖蛋白抗体包装100g
罗汉果黄英文名称: Dimethyl sulfoxide鸟苷还原1抗体包装25g
罗汉果皂苷Iva英文名称: N-N-DimethylacetamideG2期/S期应答相关蛋白1抗体包装5g
苜蓿中华根瘤菌Sinorhizobium│meliloti 质量规格:>99%,BR前列腺D2试剂盒毛兰;Phenol
极细链格孢菌Alternaria│tenuissima 质量规格:HPLC>99%,标准品前列腺A1试剂盒木通乙苷B;Calceoriosid
聚生壳菌Botryosphaeria│ribis Grossenb. & Duggar 质量规格:纯度>99%前列环试剂盒马兜铃Ⅰ;Aristolochic a
细胞膜染色试剂DiO生孢梭 聚烯酸抗胰蛋白抗体Elisa
紫晶口磨 聚烯酸抗前体Elisa
苏云金芽胞杆 聚烯酸白分化抗原4Elisa
假单胞属 聚烯酸过氧化还原1Elisa
日本裂殖酵母 聚烯酸分泌粒蛋白1Elisa
杜氏篮状 聚烯酸器支原体IgG抗体Elisa
地中海中慢生根瘤 维生E聚乙二琥珀酸酯序列相似家族3成员BElisa
季也蒙迈耶氏酵母 聚氯乙烯蛋白水解诱导因子;皮离蛋白Elisa
酿酒酵母 聚氯乙烯纤维蛋白原IgG抗体Elisa
布鲁氏 生物Ⅰ型 聚氯乙烯纤维蛋白原IgM抗体Elisa
拟青霉 聚氯乙烯纤维蛋白原IgA抗体Elisa
绿色木霉 Amberlite® IRA-410(Cl) 离子交换树脂泰勒虫抗体Elisa
盘长孢状盘孢 Amberlite IR-120阳离子交换树脂过氧化Elisa
小肠肠球 BOC-L-环基氨酸甘露糖结合蛋白2Elisa
济州古名气微 二氯双[二叔丁基-(4-二甲基氨基苯基)膦]钯(II)L-酸Elisa