详细介绍
商品介绍:
淋巴细胞分离液(Lymphocyte Separation Medium 1.084,简称LSM-1.084)是一种无菌的即用型分离液,基于B?yum的Ficoll-甲泛影钠溶液做过一些改良,使得操作简单快速且分离效率更高。本品是无菌的聚蔗糖Ficoll/泛影酸钠混合溶液,密度为1.084 g/ml,内毒素含量很低(<0.12 EU/ml),是在严格控制的环境下加工的,条件符合ISO13485:2003标准和GMP认证。相对于密度为1.077 g/ml的人淋巴细胞分离液,本品适用于分离更高密度的人单个核细胞,包括外周血,脐带血以及骨髓瘤来源的组织样本?;故视糜诜掷氪笮∈笱赴?,正因为啮齿动物的淋巴细胞密度稍高于人淋巴细胞。 工作原理 去纤维蛋白或抗凝人血以1:1的比例用无菌生理盐水或平衡盐溶液稀释,小心的添加在分离液上层(不要混杂在一起),之后离心30-40min。离心过程中,差速迁移使其终形成几个不同的细胞分层: ①聚集在管底的颗粒主要是Ficoll 聚集的红细胞以及沉淀物; ②紧挨着上面一层的颗粒主要是粒细胞,其处于LSM-1.084溶液的渗透压临界,具有足够高的密度迁移穿过LSM-1.084溶液层。 ③单个核细胞分布在血浆和LSM-1.084分离液的中间层,还包括一些沉降系数低(密度低)的颗粒,如血小板。 淋巴细胞,单核细胞和血小板不具有足够高的密度穿透LSM-1.084分离液层,因此这些细胞在血浆和LSM-1.084分离液层聚集形成一个中间分层。吸取中间层,用平衡盐溶液短暂洗涤,以除去血小板,细胞分离介质和血浆,就可以单个核细胞。通常情况下,分离所得的细胞中95±5%为单个核细胞,细胞存活率>90%,回收率为60±20%。 储存条件:4~8℃,避光 |
产品属性:
中文名称:淋巴细胞分离液1.084
英文名称:Lymphocyte separation medium1.084
产品规格:100ml
发货周期:1~3天
公司产品仅用于科研
细胞生物学研究有以下几个方面:
细胞生物学的研究内容十分广泛,主要包括:
①细胞核、染色体以及基因表达的研究;
②生物膜与细胞器的研究;
③细胞骨架体系的研究;
④细胞增殖及其调控;
⑤细胞分化及其调控;
⑥细胞的衰老与编程性死亡(凋亡);
⑦细胞的起源与进化;
⑧细胞工程.
实验报告:
一、分离与培养:
1、无菌条件下,取出1-3d 龄SD大鼠心房组织,然后用PBS将此组织块清洗2次,最后将1mm3左右大?。?/span>
2、往组织块中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型胶原酶),混悬10s,置37℃条件下消化10min,之后用滴管吹打制成单细胞悬液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置;
3、剩下的组织再加入3~4mL酶消化液,混悬10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置,重复此步骤2-3次,直至组织*被消化;
4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液,1200r/min 离心10min,弃去上清,沉淀细胞用含有10% FBS DMEM/F12培养基混悬,接种于25cm2培养瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培养箱中培养;
5、差速贴壁1h后,吸出培养基,按实验需要接种于6孔板中继续培养;
二、免疫荧光鉴定:
1、待心房肌细胞生长至80%融合时,弃去培养基,用温育的PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室温条件下固定细胞15min;
2、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在4℃条件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在室温条件下,用4% BSA封闭细胞30min;
4、按1: 100的比例稀释α-actin一抗,然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜;
5、PBS冲洗细胞3次,每次10min,按1:150的比例稀释抗α-actin的二抗, 37℃条件下放置1h;
6、用PBS冲洗3次,每次10min,最后在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照。
操作规程
1、在96孔板加入细胞100μL/孔,通常细胞增殖实验每孔加入100微升2000个细胞,细胞毒性实验每孔加入100微升5000~10000个细胞(具体每孔所用的细胞的数目,需根据细胞的大小,细胞增殖速度的快慢等决定)。置37℃ 5%CO2细胞培养箱培养24小时.
2、.加入适当浓度的0~10μL 受试化合物。
3、将96孔板在37℃,含5% CO2空气及100%湿度的细胞培养箱中孵育适当时间。
4、将5×MTT 用稀释液稀释成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小时,使MTT 还原为甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板摇床摇匀。
7、酶标仪在570nm 波长处检测每孔的光密度(如无570nm 滤光片,可以使用560-600nm 的滤光片)。
8、结果分析
a、细胞的存活率:将各测试孔的OD 值减去本底OD 值(*培养基加MTT,无细胞)或空白药物孔OD 值(*培养基加受试药物的不同稀释度加MTT,无细胞),各重复孔的OD 值取平均数±SD。细胞的存活率以T/C%表示,T 为加药细胞的OD 值,C 为对照细胞的OD 值。细胞存活率% =(加药细胞OD/对照细胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 时的药物浓度(IC50)及T/C = 10%时的药物浓度(IC90)
磷咯萘啶(标准品)英文名称: TopiramateCAP1抗体包装5g
磷喹(标准品)英文名称: Tozasertib,VX-680/MK-0457粒-巨噬集落激因子3抗体包装1g
磷哌喹(标准品)英文名称: Trospium chloride 表面趋化因子受体7抗体包装250mg
磷氢钙(标准品)英文名称: AG-014699色c氧化10抗体包装5g
膦钠(标准品)英文名称: Carfilzomib/PR171CRTAM抗体包装5g
硫喷妥(标准品)英文名称: CEP-18770单核趋化蛋白4抗体包装100ml
硫普罗宁(标准品)英文名称: Managlinat Dialanetil/CS-917NK抑制性受体2DL3抗体包装25ml
硫阿米卡星(标准品)英文名称: Nolatrexed dihydrochlorideCRX抗体包装100g
硫阿托品(标准品)英文名称: PD 173074CD8抗体包装25g
硫安普霉(标准品)英文名称: PH-797804磷化原癌蛋白CBL2抗体包装500g
硫巴龙霉(标准品)英文名称: Tifluadom/KC-5103磷化原癌蛋白CBL2抗体包装5g
硫长春碱(标准品)英文名称: Valacyclovir HCl磷化周期依赖激2抗体包装25g
硫长春新碱/硫基长春碱(标准品)英文名称: Valacyclovir HCl磷化周期依赖激2抗体包装5g
硫多粘菌B(标准品)英文名称: Vecuronium Bromide分裂周期蛋白25抗体包装25g
硫(标准品)英文名称: Vecuronium Bromide磷化分裂周期蛋白25抗体包装5g
腐皮镰孢菌Haematonectria│haematococca (Berk. & Broome) Samuels & Rossman 质量规格:>98%纤连蛋白试剂盒苔黑酚葡萄糖苷;Orcinolgluco
米曲霉Aspergillus│oryzae 质量规格:HPLC≥98%,标准品纤调蛋白试剂盒太子参环肽B;Heterophyllin
球孢白僵菌Beauveria│bassiana (Bals.-Criv.) Vuill. 质量规格:>98%,USP,BR细小病B19试剂盒土木香内酯;Alantolactone
淋巴细胞分离液1.084纳西杆 N-Boc-D-亮氨次Elisa
白灵菇 4-氨基-3-溴甲酯尿胆Elisa
假单胞 3-磺酰氨基乙酸甲酯-2-噻吩甲酸甲酯黄单核苷酸Elisa
壳囊孢属 卢非酰色P45026B1Elisa
大肠埃希 月桂酸正丁酯游离球蛋白EElisa
大肠埃希氏 十三烷二酸环乙撑酯恙虫病IgG抗体Elisa
匍枝根霉(黑根霉) 4-基-2-氟苯甲α-溶蛋白43-49Elisa
解烃棒杆 2-甲基基戊酸酯α1唾液淀粉Elisa
草假单胞 反式-4-(4-氟苯基)-3-羟甲基-1-甲基透明带抗体Elisa
酿酒酵母 己酸异丁酯HCG抗体Elisa
橙色土地杆 富马酸二丁酯尼克酰腺嘌呤二核苷酸Elisa
球毛壳 2-氟-5-甲氧基苯甲脂肪酸延长5Elisa
大肠埃希氏 巴豆酸乙酯Δ5去饱和Elisa
香菇 2-甲氧基-N-黄体生成受体Elisa
枯草芽胞杆 4-氯-3-羟基-丁卵泡受体Elisa