详细介绍
商品介绍:
细胞膜染色试剂盒是用一种亲脂性的橙色荧光探针进行细胞膜染色。染色液I 进入细胞膜后,在整个细胞膜上扩散,佳浓度时可以使整个细胞膜染色。染色液I在进入细胞膜之前荧光非常弱,当与细胞膜结合后其荧光强度大大增强,被激发后可以发出橙色的荧光,具有很高的淬灭常数和激发态寿命。 染色液I 通常不会明显影响细胞的活力,因此被广泛用于正向或逆向的,活的或固定的神经等细胞或组织的示踪剂或长期示踪剂(long-term tracer)。除了简单的细胞膜荧光标记外,还可以用于检测细胞的融合和粘附,检测发育或移植过程中细胞迁移,通过FRAP(Fluorescence Recovery After Photobleaching)检测脂在细胞膜上的扩散,检测细胞毒性和标记脂蛋白等。 储存条件:4℃避光保存。长期保存-20℃避光保存。 有效期:六个月。 |
产品属性:
中文名称:细胞膜染色试剂盒(橙色荧光)-M03
英文名称:
产品规格:1000T|5000T
发货周期:1~3天
公司产品仅用于科研
细胞生物学研究有以下几个方面:
细胞生物学的研究内容十分广泛,主要包括:
①细胞核、染色体以及基因表达的研究;
②生物膜与细胞器的研究;
③细胞骨架体系的研究;
④细胞增殖及其调控;
⑤细胞分化及其调控;
⑥细胞的衰老与编程性死亡(凋亡);
⑦细胞的起源与进化;
⑧细胞工程.
实验报告:
一、分离与培养:
1、无菌条件下,取出1-3d 龄SD大鼠心房组织,然后用PBS将此组织块清洗2次,最后将1mm3左右大??;
2、往组织块中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型胶原酶),混悬10s,置37℃条件下消化10min,之后用滴管吹打制成单细胞悬液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置;
3、剩下的组织再加入3~4mL酶消化液,混悬10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置,重复此步骤2-3次,直至组织*被消化;
4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液,1200r/min 离心10min,弃去上清,沉淀细胞用含有10% FBS DMEM/F12培养基混悬,接种于25cm2培养瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培养箱中培养;
5、差速贴壁1h后,吸出培养基,按实验需要接种于6孔板中继续培养;
二、免疫荧光鉴定:
1、待心房肌细胞生长至80%融合时,弃去培养基,用温育的PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室温条件下固定细胞15min;
2、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在4℃条件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在室温条件下,用4% BSA封闭细胞30min;
4、按1: 100的比例稀释α-actin一抗,然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜;
5、PBS冲洗细胞3次,每次10min,按1:150的比例稀释抗α-actin的二抗, 37℃条件下放置1h;
6、用PBS冲洗3次,每次10min,最后在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照。
操作规程
1、在96孔板加入细胞100μL/孔,通常细胞增殖实验每孔加入100微升2000个细胞,细胞毒性实验每孔加入100微升5000~10000个细胞(具体每孔所用的细胞的数目,需根据细胞的大小,细胞增殖速度的快慢等决定)。置37℃ 5%CO2细胞培养箱培养24小时.
2、.加入适当浓度的0~10μL 受试化合物。
3、将96孔板在37℃,含5% CO2空气及100%湿度的细胞培养箱中孵育适当时间。
4、将5×MTT 用稀释液稀释成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小时,使MTT 还原为甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板摇床摇匀。
7、酶标仪在570nm 波长处检测每孔的光密度(如无570nm 滤光片,可以使用560-600nm 的滤光片)。
8、结果分析
a、细胞的存活率:将各测试孔的OD 值减去本底OD 值(*培养基加MTT,无细胞)或空白药物孔OD 值(*培养基加受试药物的不同稀释度加MTT,无细胞),各重复孔的OD 值取平均数±SD。细胞的存活率以T/C%表示,T 为加药细胞的OD 值,C 为对照细胞的OD 值。细胞存活率% =(加药细胞OD/对照细胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 时的药物浓度(IC50)及T/C = 10%时的药物浓度(IC90)
连翘酯苷E(标准品)英文名称: 2-Hydroxy-5-nitronicotinic acidB淋巴生发中心相关蛋白抗体包装25g
莲心碱(标准品)英文名称: Hexatriacontane鳞状癌增强蛋白1抗体包装5g
莲心碱高盐英文名称: HexatriacontaneGα gust抗体包装1g
莲心碱高盐(标准品)英文名称: Hexadecane谷??固灏?0g
莲须(标准品)英文名称: Hexadecane绒毛膜特异性转录因子GCMa抗体包装50g
莲子(标准品)英文名称: 1-HexanolG蛋白结合蛋白5抗体包装1g
莲子心(标准品)英文名称: 1-Hexanol肿瘤/抗原家族4亚型7抗体包装25g
两面针(标准品)英文名称: 1-HexadecanolGDNF家族受体α3抗体 GFR α3包装5g
亮菌(标准品)英文名称: 1,6-Hexanediol甘受体β/GlyR β抗体包装100g
辽东楤木皂苷X(标准品)英文名称: Heptadecane神经甘肽样肽GALP抗体包装25g
了哥王(标准品)英文名称: Hentriacontane甘肽受体2抗体包装5g
烈香杜鹃(标准品)英文名称: Hexacosane甘肽受体3抗体包装1g
烈香杜鹃油(标准品)英文名称: 2,5-Hexanedione脑肠肽受体抗体包装25g
林生续断苷I英文名称: 2,5-HexanedioneGRC5蛋白抗体包装5g
林泽兰内酯B(标准品)英文名称: 3',3'',5',5''-Tetrabromophenolphthaleinethyl ester肠和大脑特定同源蛋白1抗体包装1g
热带假丝酵母Candida│tropicalis 质量规格:>98.0%,可用于培养羟脯试剂盒没食子儿茶;(-)-Gallocate
大肠埃希氏菌Escherichia│coli 质量规格:>98%,标准品强啡肽试剂盒木糖;D-Xylose
蛹假交替单胞菌Pseudoalteromonas│undina 质量规格:>98.0%潜伏转化生长因子β结合蛋白2试剂盒3-O-没食子酰粘;3-O-gallo
细胞膜染色试剂盒(橙色荧光)-M03香菇 二硅化铬磷酸化过氧化物体增殖物激活受体γ抗体Elisa
假单胞 化铪防御α2Elisa
胶孢 碲化银(I)防御α3Elisa
金色毛壳 (S)-(-)-3-氨基奎宁 活化蛋白C抵抗Elisa
Pseudomonas plecoglossicida 2,3,9,10,16,17,23,24-八辛氧基-29H,-31H-酞菁染料多肽-N-乙酰氨基半乳糖转移7Elisa
Xenorhabdus 对伞花烃镉金属硫蛋白Elisa
阿氏芽孢杆 优葛缕酮成纤维生长因子6Elisa
大肠杆 雷沙吉兰无翅型MMTV整合位点家族成员9AElisa
酿酒酵母 氯化(茚基)双(三苯基膦)钌(II)肌蛋白Fbox-1Elisa
非无药品 沙门(阳性) Ampiroxicam肌肉特异性泛蛋白连接1Elisa
费氏中华根瘤 甲基叔戊基活化转录因子6Elisa
枝状枝孢 甲氧基聚乙二马来酰前列腺分泌蛋白Elisa
稻平脐蠕孢 β-Calcitonin Gene Related Peptide human流感病A IgM抗体Elisa
青铜色小单孢 4-溴-3-甲囊虫病Elisa
赖氨酸芽胞杆属 5(6)-TAMRA [5-(6)-Carboxytetramethylrhodamine]副流感病1,2,3型IgG抗体Elisa