蛋白表达及纯化：

1.培养500ml哺乳动物细胞，然后将重组质粒转染到细胞中，通过瞬时表达产生目标蛋白。

2.收集含有目标蛋白的部分（细胞或培养上清）。

3.通过亲和，离子交换，疏水及凝胶过滤等多种层析方法纯化表达的重组蛋白。

4.通过SDS-PAGE电泳检测每步结果并控制最终产品质量。

5.通过Western-blot验证目标蛋白正确性。

交付内容：纯化好的目标蛋白及纯化报告?？砂纯突б筇峁┖炕昵?/span>Tag）或切除纯化标签（Tag）的最终蛋白，纯度最高可达90%以上。

产品属性：

英文名称：Recombinant Alkaline Phosphatase, Intestinal (ALPI)

CIP; IAP; Calf Intestinal Alkaline Phosphatase

型号：GOY-01D405

酶与激酶

代谢通路

胃肠病学

物种：Rattus norvegicus (Rat，大鼠)

来源：原核表达

宿主E.coli

内毒素水平：<1.0EU/μg(LAL法测定)

亚细胞定位：：n/a

预测分子量：-

实际分子量：-(差异分析请参阅说明书)

片段与标签：N-terminal His Tag

缓冲液成份：磷酸盐缓冲液（pH7.4，含有 0.01% SKL, 1mM DTT, 5% Trehalose和Proclin300.）

性状：冻干粉

纯度：> 97%

等电点：-

应用：Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB.

规格10μg50μg200μg1mg5mg

以下是相关产品：

英文名称：Recombinant Glutaminyl tRNA Synthetase (QARS)  产品名称：酰tRNA合成酶(QARS)重组蛋白物种：Rattus norvegicus (Rat，大鼠)

英文名称：Recombinant Methionyl tRNA Synthetase (MARS)  产品名称：甲硫氨酰tRNA合成酶(MARS)重组蛋白物种：Homo sapiens (Human，人)

英文名称：Recombinant Methionyl tRNA Synthetase (MARS)  产品名称：甲硫氨酰tRNA合成酶(MARS)重组蛋白物种：Mus musculus (Mouse，小鼠)

英文名称：Recombinant Aspartyl tRNA Synthetase (DARS)  产品名称：天冬氨酰tRNA合成酶(DARS)重组蛋白物种：Homo sapiens (Human，人)

英文名称：Recombinant Valyl tRNA Synthetase (VARS)  产品名称：缬氨酰tRNA合成酶(VARS)重组蛋白物种：Homo sapiens (Human，人)

英文名称：Recombinant Valyl tRNA Synthetase (VARS)  产品名称：缬氨酰tRNA合成酶(VARS)重组蛋白物种：Mus musculus (Mouse，小鼠)

操作步骤：

Ⅰ 实体组织蛋白的提取

1． 在每1mL 冷Lysis Buffer加入10 μL磷酸酶抑制剂， 1 μL蛋白酶抑制剂和 5μL 100mM PMSF，混匀。冰上保存数分钟待用。

2．  每100mg固体组织置于培养皿中，剪碎成3mm×3mm左右的小块，加入0.5～1 mL冷 Lysis Buffer，玻璃匀浆器上下手动匀浆15次，注意低温操作；

3． 取组织匀浆液转移到1.5mL预冷的离心管，离心10000转/分，4℃离心5 min；

4． 取上清转移至新的预冷的离心管中，即为全蛋白提取物，蛋白定量（Bradford法、BCA法）；

5． 分装保存于-70℃,避免反复冻融。

Ⅱ 培养细胞蛋白提取

1． 贴壁培养的细胞，吸去培养基后，加入10mL/150mm培养板的冷PBS洗两次，每次振摇数次以尽量去除培养液；

2． 悬浮培养的细胞或用细胞刮子刮下的贴壁细胞，将细胞及培养液移至离心管中， 1000转/分离心10 min，再用10mL/150mm培养板的冷PBS，1000转/分离心5 min洗两次；

3． 在每 1mL冷 Lysis Buffer加入10μL磷酸酶抑制剂， 1μL蛋白酶抑制剂和5μL 100mM PMSF，混匀。冰上保存数分钟待用。

4． 细胞洗涤后，转至新的预冷的离心管中，加入上述配制好的冷Lysis Buffer，加入量如下表所示：

5．置于4℃摇床平台上，温和振荡15 min；

6． 14,000rpm，4℃离心15min，取上清为全蛋白提取物, 蛋白定量（Bradford法、BCA法）；

7． 分装保存于-70℃,避免反复冻融。

公司正在出售的产品：

肝癌新基因3蛋白抗体 DACT1

有丝分裂控制蛋白dis3抗体 DIS3

Dapper2蛋白抗体 Dact2

Dapper3蛋白抗体 DACT3

背神经管核蛋白抗体 DNTNP

双甲基水解酶1抗体 DDAH1

/蛋白激酶DCAMKL1抗体 DCAMKL1

唐氏综合征细胞粘附分子抗体 Dscam

穿膜蛋白DLK1抗体（C端） DLK1

二氢还原酶样1抗体 DHFRL1

磷脂酸磷酸酶HTPAP抗体 DPPL1

脱氧尿苷三磷酸酶DUT抗体 DUT

肠碱性磷酸酶(ALPI)重组蛋白大鼠HL-7702(人肝正常细胞)5×106cells/瓶×2

叠氮化物葡萄糖液态培养基 规格： 250g 用途： 用于水和污水中粪性链球菌发酵法的推测试验(CJ/T148-2001和SN/T2206.5-2009)。

人腺细胞英文名称：MDA-MB-231

PYG液体培养基 规格： 250g 用途： 培养双歧杆菌用于乙酸和酸代谢产物测定

骨肉瘤英文名称：HOS

Baird-Parker基础 规格： 250g 用途： 用于凝固酶阳性葡萄球菌的选择性分离培养和计数(GB 4789.10－2010，SN0172-92和化妆品卫生规范微...

SPARC样蛋白1(SPARCL1)重组蛋白英文名称：Recombinant SPARC Like Protein 1 (SPARCL1)

M-TEC/M-TEC Agar用于水中耐热大肠杆菌滤膜计数250克国产/进口

细胞色素P450家族成员7A1(CYP7A1)重组蛋白英文名称：Recombinant Cytochrome P450 7A1 (CYP7A1)

波尔顿选择性增菌肉汤/波尔顿肉汤/Bolton Selective Enrichment Broth弯杆菌的选择性增菌培养250克国产/进口

解整合素金属10(ADAM10)重组蛋白英文名称：Recombinant A Disintegrin And Metalloprotease 10 (ADAM10)