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供货周期 | 现货 | 规格 | 10μg50μg200μg1mg5mg |
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货号 | GOY-01D313 | 应用领域 | 化工 |
主要用途 | 仅供科研实验 | 英文名称 | Recombinant Prostaglandin I Synthase (PTGIS) |
物种 | Homo sapiens (Human,人) |
产品属性:
产品名称 | 物种 | 货号 |
前列腺素I合酶(PTGIS)重组蛋白人 | Homo sapiens (Human,人) | GOY-01D313 |
英文名称:Recombinant Prostaglandin I Synthase (PTGIS)
PGIS; CYP8A1; Prostacyclin Synthase; Prostacycline Synthetase; Prostagladin I2 Synthetase; PGI2 Synthetase; Cytochrome P450,Family 8,Subfamily A,Polypeptide 1
型号:GOY-01D313
酶与激酶
代谢通路
心脑血管
激素代谢
物种:Homo sapiens (Human,人)
来源:原核表达
宿主E.coli
内毒素水平:<1.0EU/μg(LAL法测定)
亚细胞定位::内质网腔
预测分子量:60.8kDa
实际分子量:61kDa(差异分析请参阅说明书)
片段与标签:Met1~Pro500 with N-terminal His Tag
缓冲液成份:20mM Tris, 150mM NaCl缓冲液(pH8.0, 含有1mM EDTA, 1mM DTT, 0.01% SKL, 5% Trehalose和Proclin300)
性状:冻干粉
纯度:> 95%
等电点:6.8
应用:Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB.
规格10μg50μg200μg1mg5mg
蛋白表达及纯化:
1.培养500ml哺乳动物细胞,然后将重组质粒转染到细胞中,通过瞬时表达产生目标蛋白。
2.收集含有目标蛋白的部分(细胞或培养上清)。
3.通过亲和,离子交换,疏水及凝胶过滤等多种层析方法纯化表达的重组蛋白。
4.通过SDS-PAGE电泳检测每步结果并控制最终产品质量。
5.通过Western-blot验证目标蛋白正确性。
交付内容:纯化好的目标蛋白及纯化报告??砂纯突б筇峁┖炕昵?/span>Tag)或切除纯化标签(Tag)的最终蛋白,纯度最高可达90%以上。
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操作步骤:
Ⅰ 实体组织蛋白的提取
1. 在每1mL 冷Lysis Buffer加入10 μL磷酸酶抑制剂, 1 μL蛋白酶抑制剂和 5μL 100mM PMSF,混匀。冰上保存数分钟待用。
2. 每100mg固体组织置于培养皿中,剪碎成3mm×3mm左右的小块,加入0.5~1 mL冷 Lysis Buffer,玻璃匀浆器上下手动匀浆15次,注意低温操作;
3. 取组织匀浆液转移到1.5mL预冷的离心管,离心10000转/分,4℃离心5 min;
4. 取上清转移至新的预冷的离心管中,即为全蛋白提取物,蛋白定量(Bradford法、BCA法);
5. 分装保存于-70℃,避免反复冻融。
Ⅱ 培养细胞蛋白提取
1. 贴壁培养的细胞,吸去培养基后,加入10mL/150mm培养板的冷PBS洗两次,每次振摇数次以尽量去除培养液;
2. 悬浮培养的细胞或用细胞刮子刮下的贴壁细胞,将细胞及培养液移至离心管中, 1000转/分离心10 min,再用10mL/150mm培养板的冷PBS,1000转/分离心5 min洗两次;
3. 在每 1mL冷 Lysis Buffer加入10μL磷酸酶抑制剂, 1μL蛋白酶抑制剂和5μL 100mM PMSF,混匀。冰上保存数分钟待用。
4. 细胞洗涤后,转至新的预冷的离心管中,加入上述配制好的冷Lysis Buffer,加入量如下表所示:
细胞数量 | Lysis Buffer加入量 |
107个 | 0.5 mL~1 mL |
5×106个 | 0.2 mL~0.5 mL |
5.置于4℃摇床平台上,温和振荡15 min;
6. 14,000rpm,4℃离心15min,取上清为全蛋白提取物, 蛋白定量(Bradford法、BCA法);
7. 分装保存于-70℃,避免反复冻融。
公司正在出售的产品:
着丝粒蛋白Q抗体 CENPQ
着丝粒蛋白N抗体 CENPN
CENTB2蛋白抗体 Centaurin beta 2
着丝粒蛋白Q抗体 CENPQ
CENTA2蛋白抗体 Centaurin alpha 2
胞吞再循环相关衔接蛋白CENTB1抗体 CENTB1
磷酸化胞吞再循环相关衔接蛋白CENTB1抗体 phospho-CENTB1 (Ser554)
CENTD1蛋白抗体 CENTD1
中心体蛋白3抗体 Centrin 3
中心体蛋白1+2抗体 Centrin-1+Centrin-2
CENTG3蛋白抗体 CENTG3
中心体蛋白2抗体 Centrin 2
前列腺素I合酶(PTGIS)重组蛋白人杆菌属 Lactobacillus sp.Lncap clone FGC(人前列腺细胞)
柠檬串珠菌 Leuconostoc citreum热带假丝酵母 Candida tropicalis
金色产色链霉菌 Streptomyces aureochromogenes植物杆菌 Lactobacillus plantarum
豇豆慢生根瘤菌 Bradyrhizobium vigna马杜拉放线菌 Actinomadura sp.
大鼠肾上腺嗜鉻细胞瘤细胞(低分化)小鼠垂体瘤细胞
小鼠成纤维细胞(EGFP标记)A549(人非小细胞肺细胞)
荧光假单胞菌 Pseudomonas fluorescens植物杆菌 Lactobacillus plantarum
宇佐美曲霉 Aspergillus usamii人肺成纤维细胞培养基
香菇 Lentinula edodes地衣芽孢杆菌 Bacillus licheniformis
灰色链霉菌 Streptomyces griseus鼠杆菌 Lactobacillus murinus
小鼠子宫内膜上皮细胞培养基海洋芽胞杆菌 Oceanobacillus sp.
RKO-E6(人结肠转基因细胞)NCI-H157(人非小细胞肺腺细胞)
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