蛋白表达及纯化：

1.培养500ml哺乳动物细胞，然后将重组质粒转染到细胞中，通过瞬时表达产生目标蛋白。

2.收集含有目标蛋白的部分（细胞或培养上清）。

3.通过亲和，离子交换，疏水及凝胶过滤等多种层析方法纯化表达的重组蛋白。

4.通过SDS-PAGE电泳检测每步结果并控制最终产品质量。

5.通过Western-blot验证目标蛋白正确性。

交付内容：纯化好的目标蛋白及纯化报告?？砂纯突б筇峁┖炕昵?/span>Tag）或切除纯化标签（Tag）的最终蛋白，纯度最高可达90%以上。

产品属性：

英文名称：Recombinant Granzyme A (GZMA)

CTLA3; HFSP; HF; H factor; Granzyme 1; Fragmentin-1; Hanukkah factor; Cytotoxic T-Lymphocyte-Associated Serine Esterase 3; CTL tryptase; Cytotoxic T-lymphocyte proteinase 1

型号：GOY-01D264

酶与激酶

感染免疫

免疫分子

物种：Mus musculus (Mouse，小鼠)

来源：原核表达

宿主E.coli

内毒素水平：<1.0EU/μg(LAL法测定)

亚细胞定位：：分泌, 细胞质

预测分子量：26.9kDa

实际分子量：29kDa(差异分析请参阅说明书)

片段与标签：Ile29~Val260 with N-terminal His Tag

缓冲液成份：磷酸盐缓冲液（pH7.4，含有 0.01% SKL, 1mM DTT, 5% Trehalose和Proclin300.）

性状：冻干粉

纯度：> 97%

等电点：9.4

应用：Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB.

规格10μg50μg200μg1mg5mg

以下是相关产品：

英文名称：Recombinant Procollagen Lysine-1,2-Oxoglutarate-5-Dioxygenase 1 (PLOD1)  产品名称：前胶原赖-1,2-酮戊二酸-5-双加氧酶1(PLOD1)重组蛋白物种：Homo sapiens (Human，人)

英文名称：Recombinant Procollagen Lysine-2-Oxoglutarate-5-Dioxygenase 2 (PLOD2)  产品名称：前胶原赖-2-酮戊二酸-5-双加氧酶1(PLOD2)重组蛋白物种：Homo sapiens (Human，人)

英文名称：Recombinant Procollagen Lysine-2-Oxoglutarate-5-Dioxygenase 3 (PLOD3)  产品名称：前胶原赖-2-酮戊二酸-5-双加氧酶1(PLOD3)重组蛋白物种：Homo sapiens (Human，人)

英文名称：Recombinant Tryptophan-2,3-dioxygenase (TDO)  产品名称：色-2,3-双加氧酶(TDO)重组蛋白物种：Homo sapiens (Human，人)

英文名称：Recombinant B-Lymphoid Tyrosine Kinase (BLK)  产品名称：B-淋巴激酶(BLK)重组蛋白物种：Homo sapiens (Human，人)

英文名称：Recombinant Muscle, Skeletal, Receptor Tyrosine Kinase (MUSK)  产品名称：骨骼肌特异性受体激酶(MUSK)重组蛋白物种：Mus musculus (Mouse，小鼠)

操作步骤：

Ⅰ 实体组织蛋白的提取

1． 在每1mL 冷Lysis Buffer加入10 μL磷酸酶抑制剂， 1 μL蛋白酶抑制剂和 5μL 100mM PMSF，混匀。冰上保存数分钟待用。

2．  每100mg固体组织置于培养皿中，剪碎成3mm×3mm左右的小块，加入0.5～1 mL冷 Lysis Buffer，玻璃匀浆器上下手动匀浆15次，注意低温操作；

3． 取组织匀浆液转移到1.5mL预冷的离心管，离心10000转/分，4℃离心5 min；

4． 取上清转移至新的预冷的离心管中，即为全蛋白提取物，蛋白定量（Bradford法、BCA法）；

5． 分装保存于-70℃,避免反复冻融。

Ⅱ 培养细胞蛋白提取

1． 贴壁培养的细胞，吸去培养基后，加入10mL/150mm培养板的冷PBS洗两次，每次振摇数次以尽量去除培养液；

2． 悬浮培养的细胞或用细胞刮子刮下的贴壁细胞，将细胞及培养液移至离心管中， 1000转/分离心10 min，再用10mL/150mm培养板的冷PBS，1000转/分离心5 min洗两次；

3． 在每 1mL冷 Lysis Buffer加入10μL磷酸酶抑制剂， 1μL蛋白酶抑制剂和5μL 100mM PMSF，混匀。冰上保存数分钟待用。

4． 细胞洗涤后，转至新的预冷的离心管中，加入上述配制好的冷Lysis Buffer，加入量如下表所示：

5．置于4℃摇床平台上，温和振荡15 min；

6． 14,000rpm，4℃离心15min，取上清为全蛋白提取物, 蛋白定量（Bradford法、BCA法）；

7． 分装保存于-70℃,避免反复冻融。

公司正在出售的产品：

神经网蛋白CopineVI抗体 Copine-6

转录激活蛋白CRSP9抗体 CRSP9

脑型肉碱棕榈酰转移酶1C抗体 Cpt1c

补体因子B抗体 Factor B

乙酰受体前体蛋白AChRα1抗体 CHRNA1

猪瘟病毒包膜糖蛋白E2抗体 CSFV Envelope glycoprotein E2

冷休克结构域蛋白C2抗体 CSDC2

碳酸酐酶10抗体 CA10

致癌基因C-Myc抗体 C-Myc

胆囊收缩素8抗体 CCK8

L选择素抗体 CD62L

上皮钙粘附分子抗体 E cadherin

颗粒酶A(GZMA)重组蛋白小鼠解烃棒杆菌 Corynebacterium nydrocarboclastus地衣芽孢杆菌 Bacillus licheniformis

人角膜成纤维细胞培养基卵孢白僵菌 Beauveria brongniartii

BRL-3A(大鼠正常肝细胞)大豆慢生根瘤菌 Bradyrhizobium japonicum

Saos-2，人成骨肉瘤细胞A875(人黑色素瘤细胞)

植物杆菌 Lactobacillus plantarum塔宾曲霉 Aspergillus tubingensis

金龟子绿僵菌 Metarhizium anisopliae黑木耳 Auricularia auricula

人脂肪细胞培养基大豆慢生根瘤菌 Bradyrhizobium japonicum

中性红染色液侧耳 Pleurotus sp.

rEPC，大鼠内皮祖细胞-骨髓费氏中华根瘤菌 Sinorhizobium fredii

CoC1/DDP(人卵巢耐药细胞亚株)骨肉瘤

酸球菌亚种 Lactococcus lactis subsp. lactisSK-N-SH, 人神经母细胞瘤细胞

柠檬形克勒克酵母 Kloeckera opiculata铜绿假单胞菌 Pseudomonas aeruginosa

香菇 Lentinula edodes苜蓿中华根瘤菌