一、產(chǎn)品概述

G418溶液，也被稱為Geneticin，是一種氨基糖苷類抗生素。其結(jié)構(gòu)類似于慶大-霉素B1和新-霉素，但具有獨(dú)-特的生物活性。該溶液的濃度通常為50mg/ml，是一種即用型抗生素，無需進(jìn)一步處理即可直接用于細(xì)胞培養(yǎng)。

二、來源與生成

G418來源于Micromonospora rhodorangea（紅橙小單孢菌），是一種通過發(fā)酵等生物技術(shù)手段制得的抗生素。其生產(chǎn)過程嚴(yán)格遵循GMP（良好生產(chǎn)規(guī)范）等質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)，以確保產(chǎn)品的純度和安全性。

三、作用機(jī)制

G418通過與原核和真核細(xì)胞中的核糖體結(jié)合，抑制蛋白質(zhì)的合成。具體來說，它能夠與70S和80S核糖體結(jié)合，阻斷肽鏈的延伸，從而干擾蛋白質(zhì)的正常合成過程。這種抑制作用對(duì)多種細(xì)胞類型都有效，包括細(xì)菌、酵母、原生動(dòng)物、蠕蟲、高等植物和哺乳動(dòng)物細(xì)胞。

四、應(yīng)用與用途

細(xì)胞篩選：G418是最-常用的細(xì)胞穩(wěn)定轉(zhuǎn)染抗性篩選試劑。在基因工程中，當(dāng)neo基因被整合進(jìn)真核細(xì)胞DNA后，能夠啟動(dòng)neo基因編碼的序列轉(zhuǎn)錄為mRNA，從而獲得抗性產(chǎn)物氨基糖苷磷酸轉(zhuǎn)移酶的高效表達(dá)。這使得細(xì)胞能夠在含有G418的選擇性培養(yǎng)基中生長，從而篩選出表達(dá)特定抗性基因的穩(wěn)定細(xì)胞株。

細(xì)胞維持：除了篩選外，G418還用于穩(wěn)定細(xì)胞株的維持。通過持續(xù)添加G418到細(xì)胞培養(yǎng)基中，可以抑制未轉(zhuǎn)染或未獲得抗性的細(xì)胞生長，從而維持已轉(zhuǎn)染并表達(dá)抗性基因的細(xì)胞株。

五、使用注意事項(xiàng)

無菌操作：G418溶液為無菌溶液，使用過程中應(yīng)避免污染。建議在無菌條件下進(jìn)行細(xì)胞培養(yǎng)和篩選操作。

濃度選擇：用于細(xì)菌時(shí)，G418的濃度范圍通常為100200µg/mL；用于大多數(shù)哺乳動(dòng)物細(xì)胞時(shí)，濃度范圍為200500µg/mL。具體濃度應(yīng)根據(jù)實(shí)驗(yàn)需求和細(xì)胞類型進(jìn)行調(diào)整。

保存條件：本產(chǎn)品應(yīng)保存在-20°C的低溫環(huán)境中，以延長其有效期。反復(fù)凍融易導(dǎo)致抗生素失效，因此建議適當(dāng)分裝后再使用。

僅供科研實(shí)驗(yàn)用，不做其他用途！