導(dǎo)語：
本研究亮點
將含43.8 %蛋白質(zhì)的黃金藻突變體A4-1破壁藻粉(DAP)與SPI以5% DAP+95%SPI的質(zhì)量比在高水分擠壓(HME)過程中結(jié)合：
口感：擠出物彈性提升210.6%，嚼勁度增加141.7%，硬度降低19.36%。
結(jié)構(gòu)：三維結(jié)構(gòu)纖維豐富，二級結(jié)構(gòu)中α-螺旋的比例顯著增加，結(jié)合水含量顯著提高。
消化：體外模擬消化性顯著提高了37.6 %，同時減少了擠出物的苦味和澀味。
菌株背景
突變體A4-1：通過常壓室溫等離子體(ARTP)誘變技術(shù)，從野生型Auxenochlorella pyrenoidosa中篩選出的黃金色突變株。
核心優(yōu)勢：與綠色野生型 (WT) 菌株相比，在暗培養(yǎng)中的 A4-1 突變體呈黃色，葉綠素 a 減少 118 倍，未檢測到葉綠素 b。蛋白質(zhì) (44.22 % DW)、總氨基酸 (AAs，34.84 % DW) 和必需 AA (17.50 % DW) 的含量高，與 WT 相比分別增加了 31 % 、 22 % 和 30 % (p < 0.05)。
技術(shù)亮點：生物培養(yǎng)過程在線檢測儀(BODS)
全自動智能發(fā)酵
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發(fā)酵條件
初始細胞密度為1×10^8個細胞/mL；pH值6.5，通過添加1.0 mol/L硝酸并補充氮源來控制;溫度30℃；攪拌速度80 r/min；初始通氣速率1.5 L/min。在同一條件下進行平行發(fā)酵測試，分別使用氯化銨(1.52 g/L)或尿素（1.1 g/L）作為氮源，與上述以硝酸鈉為氮源的發(fā)酵中氮摩爾濃度相同。
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過程監(jiān)測
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實時監(jiān)控
如圖1A和B所示，細胞密度和生物量濃度持續(xù)增加，并在大約72到84小時進入穩(wěn)定期。
通過BODS自動檢測和控制補料，按照工藝對過程中葡萄糖濃度進行控制，氮濃度通過補料維持在494 ± 53 mg/L范圍內(nèi)（圖1D）。
如圖1E所示，使用氯化銨作為氮源時，蛋白質(zhì)含量(干重43.3%)和生產(chǎn)力（1.31克/升/天）高，而碳水化合物含量（干重24.1%）和總脂質(zhì)含量（干重13.8%）低。
核心發(fā)現(xiàn)：微藻粉如何重塑植物肉
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結(jié)構(gòu)升級
微觀3D網(wǎng)絡(luò)：掃描電鏡顯示，5% DAP使擠壓物形成類動物肌肉纖維結(jié)構(gòu)，孔隙均勻。
水分鎖定：低場核磁共振(LF-NMR)證實，DAP添加使結(jié)合水比例提升，增強產(chǎn)品保水性。5%的DAP摻入顯示出最高的固定水比例(83.70 %)。結(jié)合水的增加通常與水分活度呈負相關(guān)，從而抑制微生物生長。自由水含量直降62%，減少水分流失。
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風(fēng)味優(yōu)化
創(chuàng)新與展望
本研究介紹了一種新策略，利用來自葉綠素合成缺陷型蛋白核小球藻突變體(A 4-1菌株)的破壁藻粉(DAP)，不僅消除了傳統(tǒng)藻類生物質(zhì)的綠色和異味限制，在高水分擠壓條件下還協(xié)同增強了基于SPI的肉類類似物的結(jié)構(gòu)完整性以及生物可及性。DAP有助于蛋白質(zhì)在擠出冷卻過程中多肽鏈的重新排列，顯著提高了210.6 %的彈性，結(jié)合水比例的增加也增強了蛋白質(zhì)凝膠的穩(wěn)定性，并促進了蛋白質(zhì)纖維的形成，這是植物基肉類產(chǎn)品品質(zhì)優(yōu)化的一個突破。
未來可繼續(xù)探索綠藻缺陷突變體(A4-1菌株)在工業(yè)條件下大規(guī)模微藻發(fā)酵生產(chǎn)中的發(fā)酵性能以及氯化銨在蛋白質(zhì)合成中表現(xiàn)，以及藻類成分在調(diào)節(jié)蛋白質(zhì)-大分子相互作用中的具體作用機制。
關(guān)于BODS
生物培養(yǎng)過程在線檢測儀（Bioreaction Online Detection System, BODS）是一種對生物反應(yīng)器進行全自動在線取樣、處理、檢測和留樣的儀器。多種檢測模塊集成，可實時顯示罐內(nèi)生物量、底物消耗和產(chǎn)物生成情況，也可及時調(diào)節(jié)反饋控制系統(tǒng)，實現(xiàn)底物的精確控制流加，提高發(fā)酵過程控制效率，為發(fā)酵過程優(yōu)化和工藝放大提供強有力的數(shù)據(jù)支撐。
關(guān)于我們
天木生物專注于生物育種領(lǐng)域的儀器裝備的開發(fā)與應(yīng)用，致力于通過高效的突變技術(shù)和高通量篩選技術(shù)，改造提升產(chǎn)業(yè)傳統(tǒng)菌種開發(fā)模式，為生物制造產(chǎn)業(yè)提質(zhì)增效，提升我國生物產(chǎn)業(yè)的核心競爭力。 致力于為行業(yè)“細胞和菌種開發(fā)與篩選效率低"、“相關(guān)裝備成本昂貴"、“產(chǎn)業(yè)化落地困難"等難題提供優(yōu)秀的解決方案。
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