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實驗用水的等級
日常工作中，經(jīng)常會用到純水，比如：凍干質(zhì)控品的復(fù)溶，濃縮清洗液的稀釋，試劑的配制，儀器管路的沖洗等，純水每天都在大量參與、影響到我們的檢驗工作，但我們大部分人對純水的了解僅停留在“去離子水”上，對其制備、分級、使用以及對實驗的影響理解的并不充足。
在一些出現(xiàn)異常檢驗結(jié)果、定標(biāo)、質(zhì)控不好，檢查儀器、試劑、質(zhì)控品后仍沒能解決時，需要考慮水的影響，很可能是水質(zhì)污染進(jìn)而污染分析系統(tǒng)導(dǎo)致上述問題，隨著檢驗技術(shù)不斷進(jìn)步，標(biāo)本和試劑消耗量越來越少，只需要幾十甚至幾微升，儀器內(nèi)部管路設(shè)計也越來越精密，使得分析過程中水的影響所占比重越來越大。而檢驗科任務(wù)繁重，標(biāo)本量大，對儀器保養(yǎng)維護(hù)通常不能做到盡善盡美，從而水不斷影響檢驗工作。
我國規(guī)定實驗用水分三級。一級水用于有嚴(yán)格要求、需要zui小程度干擾的分析實驗，包括對顆粒有要求的實驗。二級水用于常規(guī)檢測。三級水常用用于玻璃器皿的預(yù)洗。臨床檢驗科使用的是二級純水，由純水機(jī)以離子交換方式制得。
表1. 三級水標(biāo)準(zhǔn)
I級 | II級 | III級 | |
zui低電阻率(MΩ .cm 25℃) | 10 | 1 | 0.1 |
微生物數(shù)量（CFU/ml） | 10 | 1000 | - |
硅酸鹽zui大含量（mg/L） | 0.05 | 0.1 | 1 |
PH | - | - | 5.0-8.0 |
顆粒物 | 0.22μm filter | - | - |
有機(jī)物 | 活性炭，蒸餾，反滲透 | - | - |
注：“-“為未做規(guī)定
純水機(jī)上zui常見到的信息是電阻率，是通過檢測正負(fù)兩個電極間純水的微電流強(qiáng)度，來推算純水中的總離子強(qiáng)度，常規(guī)臨床實驗室大于1便可達(dá)標(biāo)。純水水質(zhì)需定期檢測，檢測頻度及內(nèi)容根據(jù)實驗室的原水狀況及需要而不同，實驗室水質(zhì)檢測至少應(yīng)包括電阻率、微生物培養(yǎng)及硅酸鹽，其他指標(biāo)可實驗室自行決定，同時建議水質(zhì)檢測記錄作為質(zhì)控記錄的一部分共同存檔備查。
水質(zhì)量不合格也就意味著純水系統(tǒng)水純化的失敗，可能出現(xiàn)在原水預(yù)處理過程、三級純水的儲存和離子交換過程中的任何一步。無論哪一步失敗，其雜質(zhì)來源無外乎自來水和純水機(jī)水通道的污染物，主要有：
1. 電解質(zhì)：zui直接的影響就是對血清(漿)中同種離子測定結(jié)果的升高，如對Mg2+，Ca2+，F(xiàn)e3+，Cu2+，Zn2+等的測定，同時也對這些項目的定標(biāo)產(chǎn)生影響．由于很多金屬離子都是酶的輔因子，因此當(dāng)金屬離子含量高時往往影響酶活性的檢測(如Mg2+是多種磷酸化激酶的激活劑，水中含量超標(biāo)時會導(dǎo)致這些酶活性測定值的升高；而許多重金屬離子則對酶有抑制作用，導(dǎo)致酶活性下降)。很多陰離子也作為酶的輔因子存在，對酶活性測定產(chǎn)生影響(如Cl-對α-淀粉酶就有激活作用)。電解質(zhì)含量高的水更容易形成結(jié)晶和導(dǎo)致蛋白等有機(jī)物變性附著于管道系統(tǒng)，從而使得生化分析儀管道系統(tǒng)更易堵塞，zui終造成測定失真或失?。煌瑫r，在使用其對反應(yīng)杯進(jìn)行清洗時也很難清洗，會加速反應(yīng)杯的老化和損壞。
2. 有機(jī)物：有機(jī)物質(zhì)的影響主要在于對類似物質(zhì)測定時導(dǎo)致類似物質(zhì)測定結(jié)果的升高。同時，有機(jī)物含量升高也會加速管道系統(tǒng)和反應(yīng)杯的清洗困難及老化。
3. 顆粒物：顆粒物一般很難通過純水系統(tǒng)進(jìn)入生化分析儀管道和反應(yīng)系統(tǒng)，其來源一般都是三級純水或一級純水的儲水箱發(fā)生二次污染，但是一旦進(jìn)入除了會導(dǎo)致吸光度升高外，還很容易堵塞管道和損壞反應(yīng)杯。
4. 微生物：微生物的去除主要依賴原水的預(yù)處理，有些純水系統(tǒng)還在一級純水或超純水處加裝紫外殺菌或者微濾、超濾等裝置，迸一步除去水中殘余的細(xì)菌、微粒、熱源等。但一旦預(yù)處理失敗或純水儲存箱被二次污染，微生物及其產(chǎn)物就能進(jìn)入生化分析儀管道系統(tǒng)和反應(yīng)系統(tǒng)，可能出現(xiàn)的情況有兩種：①微生物在管道及反應(yīng)系統(tǒng)孽生，導(dǎo)致管道堵塞，同時令吸光度和杯空白升高；②微生物產(chǎn)生特定的酶對生化分析儀酶測定產(chǎn)生影響，具體產(chǎn)生什么影響取決于污染菌的類型。
5. 溶解氣體：如CO2，Cl2，H2S等溶解增多導(dǎo)致水pH值的下降，也對pH值依賴性較強(qiáng)的生化項目測定產(chǎn)生影響；某些氣體如Cl2增多，因其自身氧化性較強(qiáng)，會對與氧化還原反應(yīng)相關(guān)的生化測定項目產(chǎn)生影響，如對基于340nm處NADH和NADPH有吸收峰而建立的ALT，AST，BUN等的測定方法，會導(dǎo)測定值的升高。
純水的分裝與儲存也很重要。制備好的純水通常貯存在一較大容器內(nèi)，由于空氣中村在懸浮顆粒、有機(jī)物、微生物等各種污染物，當(dāng)空氣從蓋子縫隙進(jìn)入會對水質(zhì)造成影響，因此不能將水廠時間貯存，當(dāng)容器中的水取出放入一個二級容器中（比如燒瓶）中使用時，二級容器中的水必須每天更換，未用完的水不能倒回原容器。此外容器應(yīng)選用能防止化學(xué)或微生物污染的材質(zhì)。