| I. Background | |
| 氧化应激在细胞内促氧化和抗氧化过程的平衡中起着重要作用。它涉及不同的人类疾 病，如慢性阻塞性肺疾?。–OPD）、帕金森病（PD）、阿尔茨海默?。ˋD）、癌症和糖尿 病。Nrf2（核因子 E2 相关因子 2）是调控细胞氧化应激防御系统的核心转录因子，通过结 合抗氧化反应元件（ARE）激活下游基因表达，维持细胞内氧化还原平衡、解毒及抗炎， 其信号通路在癌症、神经退行性疾病及代谢紊乱中具有关键作用。大量证据表明，激活 Nrf2 通路可减少氧化应激引起的炎症损伤，抑制早期肿瘤的发生。因此，Nrf2 激活剂为肺 损伤、肝损伤、肾损伤、COPD、PD 和 AD 等炎症性疾病提供了一种治疗选择。 Nrf2/ARE 信号通路是细胞内氧化还原平衡的主要途径。在正常生理状态下，Nrf2 位于 细胞质中，通过与 Keap1 结合以 Keap1-Nrf2 复合物的形式锚定在胞浆内肌动蛋白骨架上， 并依赖 E3 泛素连接酶促进泛素介导的 Nrf2 降解，以维持 Nrf2 活性的基本稳态水平。在氧 化或亲电应激条件下，Nrf2 从 Keap1 释放并易位到细胞核，与小肌肌腱神经纤维肉瘤 （sMAF）蛋白形成异源二聚体，并与细胞保护基因启动子区域的 AREs 结合，触发 Nrf2 靶基因的转录。除了 Keap1 依赖性调控外，Nrf2 还可以通过 Neh6 结构域被糖原合成酶激 酶 3（GSK-3）磷酸化。通过含有β-转导蛋白重复序列的蛋白（β-TrCP）导致其泛素化和随 后的蛋白酶体降解。 | |
| II. Background | |
ARE-Luc MCF7 报告基因细胞，是由 ARE 调控并表达 Luc 荧光素酶报 告基因的 MCF7 细胞。Sulforaphane 是 Keap1/Nrf2/ARE 的诱导剂，Bardoxolone 是 NRf2 的 激活剂，原原理见下图所示。 | |
| Figure 1. ARE-Luc MCF7 原理示意图 | |
| III. Introduction | |
| Host Cell: | ARE-Luc |
| Expressed gene: | MCF7 |
| Stability: | 32 passages (in-house test, that not means the cell line will be instable beyond the passages we tested.) |
| Freeze Medium: | 90% FBS+10% DMSO |
| Culture Medium: | MEM+10% FBS+ 1% NEAA+ 1mM NaP+150 μg/ml Hygromycin B |
| Mycoplasma Testing: | Negative |
| Storage: | Liquid nitrogen |
| IV. Description of Host Cell Line | |
| Organism: | Homo sapiens, human |
| Tissue: | Mammary gland, breast; derived from metastatic site: pleural effusion |
| Disease: | Breast adenocarcinoma |
| Morphology: | Epithelial-like cells growing as monolayers |
| Growth Properties: | Adherent |
| V. Representative Data | |
| |
| Figure 2. Induction of ARE activity by Sulforaphane in ARE-Luc MCF7(C59). Induction of ARE activity by Bardoxolone in ARE-Luc MCF7(C59). | |
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