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在組織切片過程中,一些組織內含有骨質或鈣化灶時,含鈣的組織不宜直接用石蠟包埋切片,這是因為鈣和石蠟之間的密度不同,較難切出完整的切片。對含鈣組織固定之后,再進行脫鈣或二者同時進行,然后進行下游操作如脫水、透明、浸蠟、包埋、切片;用于脫鈣的試劑很多,脫鈣劑包括有機酸、無機酸、乙二胺四乙酸(EDTA)以及電解法脫鈣,EDTA是一種相對較好的螯合脫鈣劑,對組織結構影響最小,可以較好的保存組織的某些酶類,經EDTA脫鈣后的組織可以進行免疫組化和原位雜交染色,但是該法脫鈣速度太慢,一般脫需要數周至數月。
Leagene EDTA脫鈣液(15%)主要由EDTA二鈉鹽、磷酸鹽等組成,pH值為7.2;其優(yōu)點是:①經EDTA脫鈣的組織染色結果好;②對組織的結構損害小;③適用于免疫組化和原位雜交染色;其缺點是:①脫鈣速度很慢,不適合常規(guī)標本脫鈣使用;②脫鈣后組織會稍微變硬;③不宜用化學方法確定脫鈣終點。該試劑僅用于科研領域,不適用于臨床診斷或其他用途。
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