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上海起發(fā)實(shí)驗(yàn)試劑有限公司

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NOF GM-020產(chǎn)品

2019-6-6  閱讀(2360)

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NOF GM-020產(chǎn)品

SUNBRIGHT® GM-020(DMG-PEG)

sunbright®GM(dmg 020(PEG)
描述
acronym:dmg -聚乙二醇2000
化學(xué)名稱:1,2-二肉豆蔻RAC的甘油,乙二醇methoxypolyethylene
中國(guó)科學(xué)院#:
PEG鏈的分子量:2000
組成:烷基r1coo = C14:0、r2coo = C14:0

 

聚乙二醇化

PEG化技術(shù)應(yīng)用于生物制劑修飾,例如細(xì)胞因子,抗體片段,白細(xì)胞介素,激素,寡核苷酸和一些蛋白質(zhì)和肽。

PEG化可以進(jìn)行

  • 提高生物利用度
  • 延長(zhǎng)血液循環(huán)
  • 大化藥代動(dòng)力學(xué)
  • 低分析免疫原性

NOF為從早期開發(fā)階段到商業(yè)用途的聚乙二醇化藥物提供高性能活化PEG,我們擁有20年制造高質(zhì)量甲氧基聚乙二醇的經(jīng)驗(yàn),這是制藥領(lǐng)域活化PEG的起始原料。我們的活化PEG具有窄的多聚和低二醇含量,分子量范圍廣,從2kDa到80kDa。

PEG-共軛

考馬斯亮藍(lán)SDS-PAGE分析PEG-ALD-胰島素。胰島素在4℃下與NOF PEG-ALD反應(yīng)。在Q Sepharose Fast Flowcolumn上純化PEG化的胰島素。

 

泳道M分子量標(biāo)記
泳道1胰島素
泳道2 PEG(ME-050AL) - 胰島素洗脫液
泳道3 PEG(ME-100AL) - 胰島素洗脫液
泳道4 PEG(ME-200AL) - 胰島素洗脫液
泳道5 PEG(ME-300AL) -胰島素洗脫液

PEG衍生物與蛋白質(zhì)的偶聯(lián):條件的實(shí)例

  1. PEG-NHS衍生物與蛋白質(zhì)胺(PEG-NHS +蛋白質(zhì)-NH 2)的偶聯(lián)條件1:50mM磷酸鹽緩沖液(pH7.2),4℃,6小時(shí)* 1)
    條件2:硼酸鹽 - 磷酸鹽緩沖液(pH8.0) ,25℃,2小時(shí)* 2)
  2. PEG-醛衍生物與蛋白質(zhì)的NH 2基團(tuán)(PEG-Ald +蛋白質(zhì)-NH 2)的偶聯(lián)
    條件:氰基石朋氫化鈉(10當(dāng)量),4℃,20小時(shí)* 3)
  3. PEG-馬來(lái)酰亞胺衍生物與SH組蛋白偶聯(lián)(PEG-馬來(lái)酰亞胺+蛋白-SH)
    條件:100mM磷酸鹽緩沖液(pH6.5),4℃,4小時(shí)
  4. PEG-NH 2衍生物與蛋白質(zhì)的COOH基團(tuán)偶聯(lián)(PEG-NH 2 +蛋白質(zhì)-COOH)
    條件:50mM磷酸鹽緩沖液(pH 7.2),WSC(2eq。),4℃,10小時(shí)
  5. PEG-對(duì)硝基苯氧基羰基衍生物與NH 2蛋白質(zhì)組(PEG-NP +蛋白質(zhì)-NH 2)的
    偶聯(lián)條件:硼酸鹽 - 磷酸鹽緩沖液(pH 8.0-8.3),rt,過(guò)夜* 2)

參考文獻(xiàn):
* 1)Abuchowski,A.,et al。(1984)Cancer Biochem。生物物理學(xué)。
7,175 。* 2)Sartore,L.,et al。(1991)Appl。生物化學(xué)。生物技術(shù)。27,45 
* 3)美國(guó)5824784

功能小組

我們提供不同系列的PEG衍生物和各種多功能官能團(tuán)。

PEG衍生物的應(yīng)用圖表



NOF活化產(chǎn)品的質(zhì)量純度

我們使用先進(jìn)的技術(shù)來(lái)測(cè)量活化PEG的質(zhì)量。以下是通過(guò)NMR或HPLC方法測(cè)量的每種活化PEG的典型分析數(shù)據(jù)。請(qǐng)注意,這些數(shù)字不是產(chǎn)品規(guī)格。


NHS類型

CS型mPEG-琥珀酰亞胺基琥珀酸酯(Mw 2k和5k):活性超過(guò)95%(NMR)

GS型mPEG-琥珀酰亞胺基戊二酸酯(Mw 5k,10k,20k,30k和40k):活性約95%(NMR)

AS型mPEG-琥珀酰亞胺甲酯(Mw 2k和5k):活性約95%(NMR)

HS型mPEG-琥珀酰亞胺基戊酯(Mw 5k,10k,20k,30k和40k):活性約95%(NMR)

TS型mPEG-琥珀酰亞胺基碳酸酯(Mw 5k,10k,12k,20k,30k和40k):活性超過(guò)95%(HPLC)


pNP型(NP系列)

mPEG-p-nitrophenyl(Mw 2k,5k,10k,20k,30k和40k):活性超過(guò)95%(HPLC)


醛類型(AL系列)

mPEG-丙醛(Mw 5k,10k,20k,30k和40k):活性超過(guò)85%(HPLC)。Mw20k的活性,HPLC的實(shí)際數(shù)據(jù)超過(guò)92%。


胺類型

PA型mPEG-丙胺(Mw 2k,5k,10k,12k,20k,30k和40k):活性超過(guò)95%(HPLC)

EA型mPEG-乙胺(Mw 5k,10k,20k,30k和40k):活性超過(guò)95%(HPLC)


硫醇型(SH系列)

mPEG-硫醇(Mw 2k,5k,10k,20k,30k和40k):活性約95%(HPLC)


馬來(lái)酰亞胺類型(MA系列)

mPEG-馬來(lái)酰亞胺(Mw 2k,5k,10k,20k,30k和40k):活性約95%(HPLC)


Oxyamine type(CA系列)

mPEG-氧胺(Mw 10k,20k,30k和40k):活性約95%(HPLC)


碘乙酰胺類型(IA系列)

mPEG- irdoacetoamide(Mw 20k,30k和40k):活性約90%(HPLC)


分析技術(shù)

NOF在制造高質(zhì)量mPEG和活化PEG方面擁有20多年的歷史。這些經(jīng)驗(yàn)使NOF能夠全面了解PEG,并在分析活化PEG方面取得了相當(dāng)大的成就。我們還發(fā)明了創(chuàng)新的分析方法,用于分析活化PEG的純度和確定雜質(zhì)水平。(*專有技術(shù)號(hào):JP4543917)以前,通過(guò)NMR測(cè)量活化的PEG的活性。然而,這種方法由于聚合物檢測(cè)不是很好,特別是對(duì)于高分子量。我們使用HPLC開發(fā)了分析方法。作為分析的結(jié)果,活性有時(shí)似乎低于NMR的結(jié)果,因?yàn)橹鞣蹇梢?與非活性峰和活化的雜質(zhì)峰(如二聚體)分離。

 

M-PEG-COOH的HPLC分析

 

M-PEG5K和M-PEG-30K的GPC分析

M-PEG5K和M-PEG-30K的GPC分析

 

M-PEG5K和M-PEG-30K的MALDI-TOF-MS分析

M-PEG5K和M-PEG-30K的MALDI-TOF-MS分析

 

 

 

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