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白介素6（IL-6）Elisa試劑盒操作步驟說明
點(diǎn)擊次數(shù)：1270 發(fā)布時(shí)間：2014-9-15
方法一 雙抗體夾心法
1. 包被：ELISA試劑盒用0.05MPH9.牰碳酸鹽包被緩沖液將抗體稀釋至蛋白質(zhì)含量為1～10μg/ml。在每個(gè)聚苯乙烯板的反應(yīng)孔中加0.1ml，4℃ 過液。次日，棄去孔內(nèi)溶液，用洗滌緩沖液洗3次，每次3分鐘。（簡稱洗滌，下同）。
2. 加樣：加一定稀釋的待檢樣品0.1ml于上述已包被之反應(yīng)孔中，置37℃ 孵育1小時(shí)。然后洗滌。（同時(shí)做空白孔，陰性對(duì)照孔及陽性對(duì)照孔）。
3. 加酶標(biāo)抗體：于各反應(yīng)孔中，加入新鮮稀釋的酶標(biāo)抗體（經(jīng)滴定后的稀釋度）0.1ml。37℃ 孵育0.5～1小時(shí)，洗滌。
4. 加底物液顯色：于各反應(yīng)孔中加入臨時(shí)配制的TMB底物溶液0.1ml，37℃ 10～30分鐘。
5. 終止反應(yīng)：于各反應(yīng)孔中加入2M硫酸0.05ml。
6. 結(jié)果判定：可于白色背景上，直接用肉眼觀察結(jié)果：反應(yīng)孔內(nèi)顏色越深，陽性程度越強(qiáng)，陰性反應(yīng)為無色或極淺，依據(jù)所呈顏色的深淺，以“+”、“-”號(hào)表示。也可測OD值：在ELISA檢測儀上，于450nm（若以ABTS顯色，則410nm）處，以空白對(duì)照孔調(diào)零后測各孔OD值，若大于規(guī)定的陰性對(duì)照OD值的2.1倍，即為陽性。
方法二 間接法
1.ELISA試劑盒用包被緩沖液將已知抗原稀釋至1～10μg/ml，每孔加0.1ml，4℃過液；
2.次日洗滌3次；
3.加一定稀釋的待檢樣品（未知抗體）0.1ml于上述已包被之反應(yīng)孔中,置37℃孵育1小時(shí),洗滌；
4.（同時(shí)做空白、陰性及陽性孔對(duì)照）于反應(yīng)孔中，加入新鮮稀釋的酶標(biāo)第二抗體（抗抗體）0.1ml；
5.37℃孵育30-60分鐘，洗滌；
6.’ELISA試劑盒zui后一遍用DDW洗滌。
小鼠一氧化氮合成酶(NOS)ELISA試劑盒 Mouse nitric oxide synthase,NOS ELISA試劑盒
小鼠誘導(dǎo)型一氧化氮合成酶(iNOS)ELISA試劑盒 Mouse inducible nitric oxide synthase,iNOS ELISA試劑盒
小鼠內(nèi)皮型一氧化氮合成酶(eNOS)ELISA試劑盒 Mouse Endothelial nitric oxide synthase,eNOS ELISA試劑盒
小鼠組胺(HIS)ELISA試劑盒 Mouse Histamine,HIS ELISA試劑盒
小鼠脂蛋白相關(guān)磷脂酶A2(Lp-PL-A2)ELISA試劑盒 Mouse lipoprotein-associated phospholipase A2,Lp-PL-A2 ELISA試劑盒
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小鼠熱休克蛋白70(HSP-70)ELISA試劑盒 Mouse Heat Shock Protein 70,Hsp-70 ELISA試劑盒
小鼠脂聯(lián)素(ADP)ELISA試劑盒 Mouse adiponectin,ADP ELISA試劑盒
小鼠熱休克蛋白40(Hsp-40)ELISA試劑盒 Mouse Heat Shock Protein 40,Hsp-40 ELISA試劑盒
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小鼠前列腺酸性磷酸酶(PAP)ELISA試劑盒 Mouse Prostatic Acid Phosphatase,PAP ELISA試劑盒
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