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技術(shù)文章
寄生菌吸器產(chǎn)生效應(yīng)子并轉(zhuǎn)運到寄主細(xì)胞中
點擊次數(shù)：1482 發(fā)布時間：2016-8-8
目前的很多研究證明吸器是活體營養(yǎng)真菌和卵菌效應(yīng)子產(chǎn)生的主要場所，并起著將效應(yīng)子轉(zhuǎn) 運到寄主植物中的作用。目前，已經(jīng)從M. lini鑒定 出30余個無毒基因，從P. graminis、P. striiformis 和P. triticina中鑒定出近50個無毒基因。通過 基因組學(xué)研究和轉(zhuǎn)錄組學(xué)研究，已經(jīng)從吸器中獲 得了大量的(500–1500個)候選效應(yīng)蛋白。本課題 組從P. triticina的吸器產(chǎn)生階段篩選到300余個候 選效應(yīng)蛋白，經(jīng)過分析發(fā)現(xiàn)，這些效應(yīng)蛋白不具有保守的氨基酸保守結(jié)構(gòu)，多態(tài)性非常強。杜冬冬對2個不同致病力小麥葉銹菌株的150個候選 分泌蛋白進(jìn)一步進(jìn)行Pfam分析，結(jié)果得到注釋的 分泌蛋白僅有36個。剩余的114個分泌蛋白使用MEME軟件進(jìn)行de novo結(jié)構(gòu)篩選和預(yù)測，結(jié)果在 15 個分泌蛋白中預(yù)測到3個保守結(jié)構(gòu)域，分別是 motif 1(YxxxxNKxDC)、motif 2(Y [N/A] Y [T/D] [H/A] [C/A] [S/H] [T/Q] [S/N] [S/G] [N/C]T [N/A] W)和motif 3([S/K] M [H/A] R [R/M] R [P/A] [W/Q])。剩余的99個P. triticina的分泌蛋白含有新 的功能motif。Godfrey等通過構(gòu)建Bgh的cDNA 文庫發(fā)現(xiàn)了菌分泌蛋白的保守結(jié)構(gòu)域Y/F/C。 根據(jù)此保守結(jié)構(gòu)進(jìn)行 EST 文庫比較，在 P . striiformis和U. maydis中都發(fā)現(xiàn)了有此結(jié)構(gòu)的分泌 蛋白。本課題組在研究P. triticina中發(fā)現(xiàn)，在大量 的候選分泌蛋白中也存在著Y/F/C的保守結(jié)構(gòu)域，而其他不產(chǎn)生吸器的真菌和卵菌中沒有此結(jié) 構(gòu)，說明這類分泌蛋白只特異的在有吸器的真菌 中表達(dá)。這些效應(yīng)蛋白的產(chǎn)生均證明吸器是產(chǎn)生 效應(yīng)子的