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总抗氧化能力（T-AOC）检测试剂盒说明书
可见分光光度法
货号：BC1310
规格：50T/48S
产品组成：使用前请认真核对试剂体积与瓶内体积是否一致，有疑问请及时联系索莱宝工作人员。

溶液的配制：

1. 提取液：使用前置于4℃冰箱或冰上预冷；

2. 标准品：10 mg FeSO₄·7H₂O。临用前加入0.9 mL蒸馏水，20μL浓硫酸，配制成40 µmol/mL FeSO₄标准溶液备用；

3. 混合液：将试剂一、试剂二、试剂三按7:1:1的比例混合，现配现用，用多少配多少。使用前置于37℃水浴锅或37℃恒温培养箱中预热10min。

产品说明：
测定对象中各种抗氧化物质和抗氧化酶等构成总抗氧化水平。在生物学、医学和药学研究中常常检测血浆、血清、唾液、尿液等各种体液，细胞或组织等裂解液、植物或中草药抽提液及各种抗氧化物(antioxidant)溶液的总抗氧化能力。

在酸性环境下，还原Fe³⁺-三吡啶三吖嗪（Fe³⁺-TPTZ）产生蓝色的Fe²⁺-TPTZ的能力反映了总抗氧化能力。


技术指标：
低检出限：0.00056 μmol/mL
线性范围：0.00078125-0.05 μmol/mL
注意：实验之前建议选择2-3个预期差异大的样本做预实验。如果样本吸光值不在测量范围内建议稀释或者增加样本量进行检测。
需自备的仪器和用品：
可见分光光度计、1mL玻璃比色皿、恒温水浴锅、低温离心机、细胞超声破碎仪、研钵/匀浆器、浓硫酸、冰和蒸馏水。
操作步骤：具体操作步骤详见“产品资料"附件
注意事项：

1. 试剂二对人体有刺激性，请采取适当的防护措施。为了您的安全和健康，请穿实验服并戴乳胶手套操作。

2. 尽量避免使用在酸性条件下呈蓝色或接近蓝色的样本，否则对本试剂盒的检测结果产生干扰。

3. 样本中不宜添加Tween、Triton和NP-40等去垢剂和DTT、巯基乙醇等影响氧化还原反应的还原剂。

4. 如果测定吸光值超过线性范围吸光值，可以增加样本量或者稀释样本后再进行测定。注意同步修改计算公式。

实验实例：

1. 取0.1g三叶草叶片加入1mL预冷的提取液进行匀浆研磨，取上清后按照测定步骤操作，测得计算ΔA测定=A测定-A空白=0.909-0.148=0.761，带入标曲y=21.056x-0.0087，得出x=0.037，按样本质量计算得：

总抗氧化能力（μmol/g质量）=34×x÷W=34×0.037÷0.1=12.58 μmol/g 质量。
相关发表文献：

1. An W, Zhang Y, Zhang X, et al. Ocular toxicity of reduced graphene oxide or graphene oxide exposure in mouse eyes[J]. Experimental eye research, 2018, 174: 59-69.

2. Zhang S, He Y, Sen B, et al. Alleviation of reactive oxygen species enhances PUFA accumulation in Schizochytrium sp. through regulating genes involved in lipid metabolism[J]. Metabolic engineering communications, 2018, 6: 39-48.

3. Liu S, You L, Zhao Y, et al. Wild Lonicera caerulea berry polyphenol extract reduces cholesterol accumulation and enhances antioxidant capacity in vitro and in vivo[J]. Food Research International, 2018, 107: 73-83.

4. Z Zhang,H Liu,C Sun,et al. A C2H2 zinc-finger protein OsZFP213 interacts with OsMAPK3 to enhance salt tolerance in rice. Journal of plant Physiology. October 2018; 100-110.(IF7.394)

5. Esmail S. Kakey,Amez A. Ismael. Evaluation of Oxidative Stress Status in Aged Human in relation to some Diseases. International Conference on Pure and Applied Sciences. August 2018

参考文献：

1. Pellegrini N, Serafini M, Salvatore S, et al. Total antioxidant capacity of spices, dried fruits, nuts, pulses, cereals

and sweets consumed in Italy assessed by three different in vitro assays[J]. Molecular nutrition & food research, 2006, 50(11): 1030-1038.

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