土壤速效钾含量检测试剂盒说明书

可见分光光度法

货号：BC3040

规格：50T/24S

产品组成：使用前请认真核对试剂体积与瓶内体积是否一致，有疑问请及时联系索莱宝工作人员。

溶液的配制：

1、 提取液：若试剂有晶体析出，37℃水浴溶解即可。

2、 试剂一：自备，甲醛。

3、 工作液：临用前在1瓶试剂三B中加入4.08mL试剂三A，充分溶解，现配现用，用不完的试剂2-8℃保存一周（每瓶配好的工作液可做22管样本测定管试验）。

4、 标准液：20 μmol/mL钾标准液。

产品说明：

速效钾是土壤中易被植物吸收利用的钾素，是表征土壤钾素供应状况的重要指标之一。及时测定和了解土壤速效钾的含量及其变化，对耕地地力评价及对指导钾肥的施用有着重要作用。

钾离子与四苯硼钠作用，形成不溶于水的白色四苯硼钾沉淀，产生的浊度在一定范围内与钾离子浓度成正比，通过检测其在420nm处的浊度来测定土壤速效钾的含量。

注意：实验之前建议选择2-3个预期差异大的样本做预实验。如果样本吸光值不在测量范围内建议稀释或者增加样本量进行检测。

需自备的仪器和用品：

可见分光光度计、台式离心机、可调式移液器、振荡器、1mL玻璃比色皿、研钵、30-50目筛、甲醛（不允许快递）、蒸馏水。

操作步骤：

一、样本处理（可适当调整待测样本量，具体比例可以参考文献）

新鲜土样风干，过30-50目筛。按照土壤质量（g）: 提取液体积(mL)为 1:5~10 的比例（建议称取约0.2g土样，加入1mL提取液），振荡提取1h，10000rpm，25℃离心10min（若离心后上清中仍有杂质，建议将上清再次离心，至澄清），取上清液待测。

二、测定步骤

1、 分光光度计预热30min以上，调节波长至420nm，蒸馏水调零。

2、 临用前将20 μmol/mL钾标准液用提取液稀释至1.2、1、0.8、0.6、0.4、0.3、0.2 μmol/mL的标准液待测。

3、 准液稀释可参考下表：

备注：实验中每个标准管需要120μL标准液。

4、 在EP管中进行以下操作（试剂一为有刺激性气味的有毒物质，建议以下试验在通风橱中操作）：

三、速效钾含量计算

1、标准曲线的绘制：根据标准管的浓度（x，μmol/mL）和吸光度ΔA标准（y，ΔA标准），建立标准曲线。根据标准曲线，将ΔA测定（y，ΔA测定）带入公式计算样本浓度（x，μmol/mL）。

2、速效钾含量计算：

速效钾含量（mg/kg）=x×10^-3 ×V样总÷W×39=0.039x ÷W

10^-3：单位换算系数，1μmol=10^-3 mmol；V样总：加入提取液体积，1mL；W：样本质量，kg；39：钾离子的相对分子质量。

注意事项：

1. 甲醛为有刺激性气味的有毒物质，建议本试验在通风橱中操作。

2. 提取液刚从低温（4℃）条件取出会有晶体析出，震荡使其溶解即可

3. 当A测定大于1时，建议将样本用提取液稀释后再进行测定，计算时需在公式中乘以相应稀释倍数；当A测定小于0.1时，建议适当增加土壤样本质量或减少提取液重新提取后再进行测定。

实验实例：

1、 取0.2g土样1加入1mL提取液，振荡提取1h，取上清按照测定步骤操作，用1mL玻璃比色皿测得计算ΔA测定=A测定-A对照=0.173-0.017=0.156，根据标准曲线y=0.8242x-0.0461，计算x=0.245μmol/mL，按样本质量计算速效钾含量得：速效钾含量(mg/kg质量)=0.039x ÷W=0.039×0.245÷0.0002=47.775 mg/kg质量。

2、 取0.2g土样2加入1mL提取液，振荡提取1h，取上清按照测定步骤操作，用1mL玻璃比色皿测得计算ΔA测定=A测定-A对照=0.889-0.003=0.886，根据标准曲线y=0.8242x-0.0461，计算x=1.131μmol/mL，按样本质量计算速效钾含量得：速效钾含量(mg/kg质量)=0.039x ÷W=0.039×1.131÷0.0002=220.545 mg/kg质量。

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