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水土中总磷酸盐含量检测试剂盒说明书
可见分光光度法
货号：BC4210
规格：50T/48S
产品组成：使用前请认真核对试剂体积与瓶内体积是否一致，有疑问请及时联系索莱宝工作人员。

溶液的配制：

1. 试剂一：浓硫酸10 mL自备。

2. 试剂二：每瓶临用前加入15 mL蒸馏水溶解备用，溶解后2-8℃保存一周。

3. 试剂四：临用前加入10 mL蒸馏水，溶解后2-8℃保存两周。

4. 试剂五：临用前加入10 mL蒸馏水，溶解后2-8℃保存两周。

5. 标准品：临用前加入1.4 mL下述稀释液溶解粉剂，配成20μmol/mL的磷标准液，2-8℃保存两周。

6. 稀释液的配制：按蒸馏水体积（mL）：试剂一体积（mL）：试剂二体积（mL）=10:1:2的比例混合即可，现用现配。

7. 定磷试剂的配制：按H₂O：试剂四：试剂五：试剂六（V:V:V:V）=2:1:1:1的比例配制，配好的工作液应为浅黄色。若变色则试剂失效，若是蓝色则为磷污染，工作液应现配现用。

注意：配试剂最好用新的烧杯、玻璃棒和玻璃移液器，也可以用一次性塑料器皿，避免磷污染。
产品说明：
总磷酸盐包含正 磷酸盐、偏磷酸盐、焦磷酸盐、多聚 磷酸盐等各种磷酸盐的形式，反应了水土中的磷酸盐水平，是一个水质和土壤质量评价的重要指标。
在酸性溶液中，在分解剂和高温条件下，将无机磷酸盐和有机磷酸盐水解成正 磷酸盐，正磷 酸盐可与钼酸铵反应成磷钼酸，在还原剂存在时被还原为磷钼蓝，在660nm处有特征吸收峰。
技术指标：
低检出限：0.0065 μmol/mL
线性范围：0.0098-1.25 μmol/mL
注意：实验之前建议选择2-3个预期差异大的样本做预实验。如果样本吸光值不在测量范围内建议稀释或者增加样本量进行检测。


需自备的仪器和用品：
可见分光光度计、天平、台式离心机、1mL玻璃比色皿、可调式移液枪、30-50目筛、漩涡震荡仪、研钵、EP管、蒸馏水、浓硫酸。
操作步骤：具体操作步骤详见“产品资料"附件
注意事项：
1、定磷试剂应现配现用，正常颜色为浅黄色，如有变色或变蓝则均为失效。
2、加入试剂三后可能会产生絮状沉淀，其对后续实验无影响，加入定磷试剂后即自行消除。
3、如果测定吸光值超过线性范围吸光值，可以增加样本量或者稀释样本后再进行测定。
实验实例：

1. 取0.1g三叶草土，加入1mL蒸馏水，再加入100μL试剂一和200μL试剂二，离心取上清稀释2倍，之后按照测定步骤操作，计算ΔA测定=A测定管-A空白管=1.162-0.006=1.156，带入标准曲线y=0.8377x+0.0055，得x=1.3734，计算含量得：

土样总磷酸盐含量（μmol/g土样）=1.3x÷W×2（稀释倍数）=1.3×1.3734÷0.1×2=35.71 μmol/g土样。

1. 取0.1g林土，加入1mL蒸馏水，再加入100μL试剂一和200μL试剂二，离心取上清稀释2倍，之后按照测定步骤操作，计算ΔA测定=A测定管-A空白管=1.087-0.006=1.081，带入标准曲线y=0.8377x+0.0055，得x=1.2839，计算含量得

土样总磷酸盐含量（μmol/g土样）=1.3x÷W×2（稀释倍数）=1.3×1.2839÷0.1×2=33.38 μmol/g土样。
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