大鼠子宮頸上皮原代細(xì)胞

培養(yǎng)信息：

包被條件 鼠尾膠原Ⅰ（2-5μg/cm2）

培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率 每2-3天換液一次

生長特性 貼壁

細(xì)胞形態(tài) 上皮細(xì)胞樣

傳代特性 可傳1-2代

消化液 0.25%

培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%

大鼠子宮頸上皮細(xì)胞分離自子宮頸組織；子宮頸位于子宮下部，近似圓錐體，上端與子宮體相連，下端深入陰道。陰道頂端的穹隆又將子宮頸分為兩部分：宮頸突入陰道的部分稱宮頸陰道部，在陰道穹隆以上的部分稱宮頸陰道上部。宮頸的中央為前后略扁的長梭性管腔，其上端通過宮頸內(nèi)口與子宮腔相連，其下端通過宮頸外口開口于陰道。內(nèi)外口之間即宮頸管。宮頸的大小與宮體比例隨年齡及內(nèi)分泌狀態(tài)等而變化；宮頸壁由黏膜、肌層和外膜組成。子宮頸可有多種疾病，包括胚胎發(fā)育異常、炎癥、瘤樣病變、良性腫瘤、惡性腫瘤、損傷、宮頸性不孕、輔助生育技術(shù)、宮頸與性、宮頸妊娠等許多問題，體外培養(yǎng)的子宮頸上皮細(xì)胞對(duì)于研究其生理功能、藥物作用以及各種致病因素作用下的病理生理改變具重要意義。

方法簡介：

公司實(shí)驗(yàn)室分離的大鼠子宮頸上皮細(xì)胞采用先膠原酶消化、后組織貼塊法，結(jié)合上皮細(xì)胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來，細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。

質(zhì)量檢測：

公司實(shí)驗(yàn)室分離的大鼠子宮頸上皮細(xì)胞經(jīng)Cytokeratin-19免疫熒光鑒定，純度可達(dá)90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。

① 組織塊培養(yǎng)法

　　組織塊培養(yǎng)是常用、簡便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團(tuán)塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中，瓶壁可預(yù)先涂以膠原薄層，以利于組織塊粘著于瓶壁，使周邊細(xì)胞能沿瓶壁向外生長。

　　② 消化培養(yǎng)法

　?、?懸浮細(xì)胞培養(yǎng)法

　　對(duì)于懸浮生長的細(xì)胞，如白血病細(xì)胞、淋巴細(xì)胞、骨髓細(xì)胞、胸水和腹水中的癌細(xì)胞和免疫細(xì)胞無需消化，可采用低速離心分離，直接培養(yǎng)，或經(jīng)淋巴細(xì)胞分層液分離后接種培養(yǎng)。

　?、芷鞴倥囵B(yǎng)

　　器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后，不進(jìn)行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng)，器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對(duì)完整性，可用于重點(diǎn)觀察細(xì)胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響，以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用。

客戶收到細(xì)胞后，請(qǐng)按照以下方法進(jìn)行操作。(該細(xì)胞傳代次數(shù)有限約 2 代，建議客戶收到細(xì)胞后盡快安排后續(xù)實(shí)驗(yàn))

1、取出細(xì)胞瓶，75%酒精消毒后拆下封口膜，放入 37℃，5%CO2 培養(yǎng)箱中靜置 6-8 小時(shí)，以穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。

2、待細(xì)胞達(dá)到 80%匯合時(shí)準(zhǔn)備進(jìn)行傳代培養(yǎng)。

3、細(xì)胞傳代：

1)吸出細(xì)胞瓶中的培養(yǎng)基，用 PBS 清洗細(xì)胞一次。

2)加入 0.125%消化液約 1mL 至培養(yǎng)瓶中，37℃消化 3min 左右；顯微鏡下觀察，待細(xì)胞回縮變圓后吸棄消化液，再加入培養(yǎng)液終止消化。

3)用吸管輕輕吹打混勻，按 1:2 或 1:3 等適當(dāng)?shù)谋壤M(jìn)行接種傳代，然后補(bǔ)充新鮮的培養(yǎng)基至 5mL，放入 37℃ 5% CO2 細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。

4)待細(xì)胞貼壁后，培養(yǎng)觀察，每隔 2-3 天更換新鮮的培養(yǎng)基。

CD3D Others Mouse 小鼠 CD3d / CD3 delta 人細(xì)胞裂解液   前脂肪細(xì)胞分化PADM  CL-0302PA319(人大腸癌細(xì)胞)  支氣管上皮細(xì)胞生長添加物BEpiCGS  Kyse510   人食管癌細(xì)胞  BIU-87/Adr 小鼠原代脂肪干細(xì)胞 小鼠原代牙髓干細(xì)胞

抑制素βE(INHβE)重組蛋白 Recombinant Inhibin Beta E (INHbE)

IL17RA Protein Human 重組人 IL17RA / CD217 蛋白 (His & Fc 標(biāo)簽)

IL1RAPL1重組人 IL-1R8 / IL1RAPL1 蛋白 Protein

GFP Protein Aequorea victoria 重組水母 GFP 蛋白

HA重組甲型流感 H10N3 (A/duck/Hong Kong/786/1979) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 蛋白 Protein

豚鼠卵清蛋白特異性IgG(OVA sIgG)ELISA 試劑盒

Rat androgen (androgen) ELISA Kit 大鼠雄激素(androgen)試劑盒

Humanβ2-Glycoprotein1AibodyIgG,β2-GP1AbIgGELISAKit 人β2糖蛋白1抗體IgG(β2-GP1AbIgG)試劑盒 進(jìn)口分裝

HumanCX3C-chemokinereceptor1,CX3CR1試劑盒人CX3C趨化因子受體1(CX3CR1)試劑盒

組織ERK1/2激酶活性定量試劑盒(A/B/C)20次

Humanprogesteronereceptor，PGRELISAKit人孕同受體(PGR)試劑盒

中文名稱   方法   規(guī)格

人葡萄糖依賴性胰島素釋放多肽(GIP)ELISAKit   ELISA.  

人胰島素原(PI)ELISAKit   ELISA.  

人胰島素受體β(ISR-β)ELISAKit   ELISA.

大鼠子宮頸上皮原代細(xì)胞豚鼠內(nèi)皮型合酶(NOS3)試劑盒 ，英文名： NOS3 ELISA Kit

Human replication protein A (RPA-70) ELISA Kit 人復(fù)制蛋白A(RPA-70)試劑盒

Rabbitsolublevasccularcelladhesionmolecule1,sVCAM-1ELISAKit 兔子可溶性血管細(xì)胞粘附分子1(sVCAM-1)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

CLIAKitforBAX(RabbitBcl-2AssaciatedXprotein)ELISAKit兔Bcl-2相關(guān)X蛋白

線蟲β-半乳糖苷酶比色法定量試劑盒20次

rabbitCollageypeⅠ,ColⅠELISAKit兔子Ⅰ型膠原(ColⅠ)試劑盒規(guī)格：96T/48T

FGFR4重組食蟹猴 FGFR4 / FGF Receptor 4 蛋白  Protein

MDM2 (urine double minute 2 0.5mgMDM2 (urine double minute 2) 雙微體2癌基因抗原

IL21R重組人 IL-21R / Interleukin-21 Receptor 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein

AK4 Protein Human 重組人 AK4 / Adenylate Kinase 4 / AK3L1 蛋白

DDR1 Protein Mouse 重組小鼠 DDR1 Kinase / MCK10 / CD167 蛋白 (His & GST 標(biāo)簽)