大鼠支氣管上皮原代細(xì)胞

培養(yǎng)信息：

包被條件 鼠尾膠原Ⅰ（2-5μg/cm2）

培養(yǎng)基 含FBS、生長(zhǎng)添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率 每2-3天換液一次

生長(zhǎng)特性 貼壁

細(xì)胞形態(tài) 上皮細(xì)胞樣

傳代特性 可傳1-2代

消化液 0.25%

培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%

大鼠支氣管上皮細(xì)胞分離自支氣管組織；支氣管（Bronchi），是指由氣管分出的各級(jí)分枝，由氣管分出的一級(jí)支氣管，即左、右主支氣管。左主支氣管與右主支氣管相比較，前者較細(xì)長(zhǎng)，走向傾斜；后者較粗短，走向較前者略直，所以經(jīng)氣管墮入的異物多進(jìn)入右主支氣管。支氣管和氣管還有以區(qū)別就是，氣管是以“C”型的氣管軟骨為支架，而支氣管不是。支氣管上皮是氣道與外界環(huán)境接觸的第一道防線，不僅是各種病原體、炎癥介質(zhì)作用的靶細(xì)胞，還作為效應(yīng)細(xì)胞合成、釋放多種炎性介質(zhì)和細(xì)胞因子，從而參與氣道炎癥及免疫反應(yīng)。支氣管上皮細(xì)胞在哮喘、慢性阻塞性肺疾病、肺癌、肺囊性纖維化以及一些感染性呼吸道疾病的發(fā)病機(jī)制中均起著重要的作用。體外培養(yǎng)的原代支氣管上皮細(xì)胞因與體內(nèi)組織在形態(tài)結(jié)構(gòu)和功能活動(dòng)上存在很大的相似性，因此，在基礎(chǔ)及臨床研究中極為重要。

方法簡(jiǎn)介：

公司實(shí)驗(yàn)室分離的大鼠支氣管上皮細(xì)胞采用蛋白酶-蛋白酶混合消化法結(jié)合機(jī)械刮刷并通過(guò)上皮細(xì)胞專(zhuān)用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來(lái)，細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。

質(zhì)量檢測(cè)：

公司實(shí)驗(yàn)室分離的大鼠支氣管上皮細(xì)胞經(jīng)PCK免疫熒光鑒定，純度可達(dá)90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。

① 組織塊培養(yǎng)法

　　組織塊培養(yǎng)是常用、簡(jiǎn)便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團(tuán)塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中，瓶壁可預(yù)先涂以膠原薄層，以利于組織塊粘著于瓶壁，使周邊細(xì)胞能沿瓶壁向外生長(zhǎng)。

　?、?消化培養(yǎng)法

　?、?懸浮細(xì)胞培養(yǎng)法

　　對(duì)于懸浮生長(zhǎng)的細(xì)胞，如白血病細(xì)胞、淋巴細(xì)胞、骨髓細(xì)胞、胸水和腹水中的癌細(xì)胞和免疫細(xì)胞無(wú)需消化，可采用低速離心分離，直接培養(yǎng)，或經(jīng)淋巴細(xì)胞分層液分離后接種培養(yǎng)。

　?、芷鞴倥囵B(yǎng)

　　器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后，不進(jìn)行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng)，器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對(duì)完整性，可用于重點(diǎn)觀察細(xì)胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響，以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用。

CD38 Others Cynomolgus 食蟹猴 SCARB3 人細(xì)胞裂解液   PANC-1(人胰腺癌細(xì)胞)     CL-0025AR42J(大鼠胰腺外分泌細(xì)胞)  原代心肌細(xì)胞培養(yǎng)特制添加劑Many types of cells 小鼠原代脂肪細(xì)胞 小鼠原代杏仁核神經(jīng)元細(xì)胞

FSCN1 (Fascin 1 protein; fascin homolog 1, actin-bundling protein 0.5mgFSCN1 (Fascin 1 protein; fascin homolog 1, actin-bundling protein) 纖維束蛋白同源物1/肌動(dòng)蛋白集束蛋白/圓線蟲(chóng)紫癜 抗原

IL36G Protein Human 重組人 IL36G / IL1F9 蛋白 (aa 18-169, His 標(biāo)簽)

CD7重組大鼠 CD7 蛋白 (Fc 標(biāo)簽) Protein

P4HB Protein Mouse 重組小鼠 P4HB / ERBA2L 蛋白

SECTM1重組人 SECTM1 / K12 蛋白 Protein

豚鼠主要組織相容性復(fù)合體(MHC/GPLA)ELISA 試劑盒

Neonatal rat thyroxine (NN-T4) ELISA Kit 大鼠新生甲狀腺素(NN-T4)試劑盒

Humangrowthhormonereleasingpeptide-Ghrelin,GHRP-GhrelinELISAKit 人生長(zhǎng)激素釋放肽ghrelin(GHRP-Ghrelin)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

HumanCrosslaps,Cr試劑盒人骨膠原交聯(lián)(Cr)試劑盒規(guī)格：96T/48T

組織DYRK1A激酶活性定量試劑盒(A/B/C)20次

humanProstaglandinF，PG-FELISAKit人前列腺素F(PGF)試劑盒規(guī)格：96T/48T

山羊β內(nèi)啡肽(β-EP)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

胰島素樣生長(zhǎng)因子結(jié)合蛋白3(IGFBP-3)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

內(nèi)皮型合成酶(eNOS)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

血清淀粉樣蛋白A(SAA)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

大鼠支氣管上皮原代細(xì)胞豬白介素6(IL-6)ELISA 試劑盒

Human ai EB virus aibody (EBV) ELISA Kit 人抗EB病毒抗體(EBV)試劑盒

Porcineplasminogenactivatorinhibitor,PAIELISAKit 豬纖溶酶原激活物抑制因子(PAI)試劑盒 進(jìn)口分裝

CLIAKitforALDELISAKit大鼠固同

血液逆轉(zhuǎn)錄酶(REVERSEANSCREPTASE)活性熒光定量試劑盒20次

MouseVascuolarcelladhesionmolecule1,VCAM-1ELISAKit小鼠血管內(nèi)皮細(xì)胞粘附分子1(VCAM-1/CD106)試劑盒

PTK6重組小鼠 PTK6 / Brk 蛋白 (His & GST 標(biāo)簽) Protein

甘露聚糖結(jié)合凝集素關(guān)聯(lián)絲蛋白酶2(MASP2)重組蛋白 Recombinant Mannose Associated Serine Protease 2 (MASP2)

ERBB3重組人 HER3 / ErbB3 蛋白 (Fc 標(biāo)簽) Protein

IL5RA Protein Human 重組人 IL5Ra / CD125 蛋白

FCGR2B Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 CD32b / FCGR2B 蛋白 (His & AVI 標(biāo)簽)

客戶(hù)收到細(xì)胞后，請(qǐng)按照以下方法進(jìn)行操作。(該細(xì)胞傳代次數(shù)有限約 2 代，建議客戶(hù)收到細(xì)胞后盡快安排后續(xù)實(shí)驗(yàn))

1、取出細(xì)胞瓶，75%酒精消毒后拆下封口膜，放入 37℃，5%CO2 培養(yǎng)箱中靜置 6-8 小時(shí)，以穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。

2、待細(xì)胞達(dá)到 80%匯合時(shí)準(zhǔn)備進(jìn)行傳代培養(yǎng)。

3、細(xì)胞傳代：

1)吸出細(xì)胞瓶中的培養(yǎng)基，用 PBS 清洗細(xì)胞一次。

2)加入 0.125%消化液約 1mL 至培養(yǎng)瓶中，37℃消化 3min 左右；顯微鏡下觀察，待細(xì)胞回縮變圓后吸棄消化液，再加入培養(yǎng)液終止消化。

3)用吸管輕輕吹打混勻，按 1:2 或 1:3 等適當(dāng)?shù)谋壤M(jìn)行接種傳代，然后補(bǔ)充新鮮的培養(yǎng)基至 5mL，放入 37℃ 5% CO2 細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。

4)待細(xì)胞貼壁后，培養(yǎng)觀察，每隔 2-3 天更換新鮮的培養(yǎng)基。