大鼠羊膜上皮原代細胞

培養(yǎng)信息：

包被條件 鼠尾膠原Ⅰ（2-5μg/cm2）

培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率 每2-3天換液一次

生長特性 貼壁

細胞形態(tài) 上皮細胞樣

傳代特性 可傳1-2代

消化液 0.25%

培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%

大鼠羊膜上皮細胞分離自胎盤組織；胎盤（placenta）是哺乳動物妊娠期間由胚胎的胚膜和母體子宮內(nèi)膜聯(lián)合長成的母子間交換物質(zhì)的過渡性器官，由羊膜、葉狀絨毛膜和底蛻膜構(gòu)成。胎兒在子宮中發(fā)育，依靠胎盤從母體取得營養(yǎng)，而雙方保持相當(dāng)?shù)莫毩⑿浴ＬケP還產(chǎn)生多種維持妊娠的激素，是一個重要的內(nèi)分泌器官。有些爬行類和魚類也以胎生方式繁殖后代，胚胎生長出一些輔助結(jié)構(gòu)如卵黃囊、鰓絲等與母體組織緊密結(jié)合，以達到母子間物質(zhì)的交換，這樣的結(jié)構(gòu)稱假胎盤。羊膜是胎盤的內(nèi)層，與眼結(jié)膜組織結(jié)構(gòu)相似，含有眼表上皮細胞，包括結(jié)膜細胞和角膜上皮細胞生長所需要的物質(zhì)，其光滑，無血管、神經(jīng)及淋巴，具有一定的彈性；在電鏡下，其分為五層：上皮層、基底膜、致密層、纖維母細胞層和海綿層，羊膜基底膜和羊膜羊膜基質(zhì)層含有大量不同的膠元，主要為Ⅰ、Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ、Ⅶ型膠原和纖維粘連蛋白、層粘連蛋白等成份。羊膜細胞主要由羊膜上皮細胞和羊膜間充質(zhì)細胞組成，均具有多分化潛能，可轉(zhuǎn)化為神經(jīng)元，且還有合成、釋放生物活性物質(zhì)和神經(jīng)營養(yǎng)因子的功能。

方法簡介：

公司實驗室分離的大鼠羊膜上皮細胞采用蛋白酶-膠原酶混合消化法結(jié)合差速貼壁法，并通過上皮細胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。

質(zhì)量檢測：

公司實驗室分離的大鼠羊膜上皮細胞經(jīng)Cytokeratin-18免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

① 組織塊培養(yǎng)法

　　組織塊培養(yǎng)是常用、簡便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中，瓶壁可預(yù)先涂以膠原薄層，以利于組織塊粘著于瓶壁，使周邊細胞能沿瓶壁向外生長。

　　② 消化培養(yǎng)法

　?、?懸浮細胞培養(yǎng)法

　　對于懸浮生長的細胞，如白血病細胞、淋巴細胞、骨髓細胞、胸水和腹水中的癌細胞和免疫細胞無需消化，可采用低速離心分離，直接培養(yǎng)，或經(jīng)淋巴細胞分層液分離后接種培養(yǎng)。

　?、芷鞴倥囵B(yǎng)

　　器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后，不進行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng)，器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對完整性，可用于重點觀察細胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響，以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用。

CD19 Others Mouse 小鼠 CD19 / Leu-12 人細胞裂解液   CCNE1 Others Mouse 小鼠 CCNE1 / Cyclin-E1 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液   TIMD4 Others Mouse 小鼠 TIMD4 / TIM4 人細胞裂解液 小鼠原代主動脈弓平滑肌細胞 小鼠原代毛囊角質(zhì)細胞

Ⅹ(F10)重組蛋白 Recombinant Coagulation Factor X (F10)

ALOX5AP Protein Human 重組人 ALOX5AP / FLAP 蛋白 (His 標簽)

IL8重組人 IL-8 / CXCL8 蛋白 (aa 1-77, Fc 標簽) Protein

HA Protein H7N9 重組甲型流感 H7N9 (A/Anhui/1/2013) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 蛋白 (His 標簽)

EFNA4重組人 Ephrin-A4 / EFNA4 蛋白  Protein

小鼠D(VD)ELISA 試劑盒

Rat bone morphogenetic protein (BMPs) ELISA Kit 大鼠骨形成蛋白(BMPs)試劑盒

HumanProteindisulfide-isomeraseprecursor,PDIELISAKit 人蛋白二硫化物異構(gòu)酶前體(PDI)試劑盒 進口分裝

ChickenLaminin,LN試劑盒雞層連蛋白/板層素(LN)試劑盒

載玻片細胞IP3R受體蛋白表達熒光顯微鏡試劑盒10/20次

MouseGelsolinELISAKit小鼠凝溶膠蛋白(Gelsolin)試劑盒

魚類釋放激素   ELISA.  

魚類狀腺原酸(T3)ELISAKit   ELISA.  

魚類(Coisol)ELISAKit   ELISA.  

魚類超敏C反應(yīng)蛋白(hs-CRP)ELISAKit   ELISA.

大鼠羊膜上皮原代細胞豚鼠基質(zhì)金屬蛋白酶抑制因子1(TIMP-1)試劑盒 ，英文名： TIMP-1 ELISA Kit

Human factor related apoptosis inducing ligand (FASL) ELISA Kit 人凋亡相關(guān)因子配體(FASL)試劑盒

MonkeyInsulin,INSELISAKit 猴胰島素(INS)試劑盒 96T/48T 進口分裝

CLIAKitforbFGF-9ELISAKit大鼠堿性成纖維細胞生長因子9

細菌乳酸脫氫酶(LDH)總活性酶動力比色法定量試劑盒20次

rabbitIerleukin4,IL-4ELISAKit兔子白介素4(IL-4)試劑盒規(guī)格：96T/48T

THPO重組小鼠 Thrombopoietin / THPO / TPO 蛋白 (His 標簽) Protein

ChRM2 (Muscarinic Acetylcholine receptor M2 0.5mgChRM2 (Muscarinic Acetylcholine receptor M2) 毒蕈堿型乙酰受體M2(抗原)

ELK1重組人 ELK1 蛋白 (His & GST 標簽) Protein

AK2 Protein Human 重組人 AK2 / Adenylate kinase 2 蛋白 (His & GST 標簽)

FGFR4 Protein Mouse 重組小鼠 FGFR4 / CD334 蛋白 (His & Fc 標簽)

客戶收到細胞后，請按照以下方法進行操作。(該細胞傳代次數(shù)有限約 2 代，建議客戶收到細胞后盡快安排后續(xù)實驗)

1、取出細胞瓶，75%酒精消毒后拆下封口膜，放入 37℃，5%CO2 培養(yǎng)箱中靜置 6-8 小時，以穩(wěn)定細胞狀態(tài)。

2、待細胞達到 80%匯合時準備進行傳代培養(yǎng)。

3、細胞傳代：

1)吸出細胞瓶中的培養(yǎng)基，用 PBS 清洗細胞一次。

2)加入 0.125%消化液約 1mL 至培養(yǎng)瓶中，37℃消化 3min 左右；顯微鏡下觀察，待細胞回縮變圓后吸棄消化液，再加入培養(yǎng)液終止消化。

3)用吸管輕輕吹打混勻，按 1:2 或 1:3 等適當(dāng)?shù)谋壤M行接種傳代，然后補充新鮮的培養(yǎng)基至 5mL，放入 37℃ 5% CO2 細胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。

4)待細胞貼壁后，培養(yǎng)觀察，每隔 2-3 天更換新鮮的培養(yǎng)基。