大鼠脓毒症模型是脓毒症研究中的重要工具，借此模型的研究成果有望指导临床，提高治疗水平。

大鼠脓毒症模型SOP：

背景：盲肠结扎穿孔模型（CLP）模型是接近于人类脓毒症机制的模型，被称为脓毒症模型的“金标准”。CLP 技术在20世纪70年代被建立。CLP 模型非常适宜用于防治脓毒症或脓毒性休克新药的临床前观察。

实验动物：

品系：SD大鼠；性别：雄性；周龄：6-8周；体重：180-220g。

操作流程：

1）动物适应性饲养7天；

2）盲肠结扎穿刺（Cecal ligation and puncture, CLP）建立脓毒症大鼠模型：麻醉 ，做腹部正中切口寻找盲肠，分离肠系膜后在盲肠中点结扎，后在结扎位置至盲肠远端的中点用 20G针做贯通穿刺，挤出少许粪便置于盲肠表面，将盲肠回纳腹腔并关腹。皮下注射镇痛药并放回笼中。

模型严重程度

盲肠结扎位置是CLP模型中死亡率和疾病严重程度的最主要决定因素。结论为：① 低位CLP或以下的死亡率几乎为零，为轻度脓毒症；② 中位CLP（50%～60%）的术后死亡率为30%，为中度脓毒症；③ 高位CLP（75%）的大鼠在术后7d内全部死亡，为重度脓毒症。而在不同程度脓毒症中，死亡主要集中在最初的48 h内。

模型评估

1. 观察大鼠的行为和生理反应: 外观、自主意识 、自主活动、  对外界刺激的反应、 眼睛是否有分泌物、 呼吸频率和质量、etc..；

2. 全血的菌落总数的单位CFU(Colony-Forming Units，菌落形成单位)； 

3. 血清指标 在手术后的0-72小时内，可以检测血液相关反映炎症水平和脏器损伤情况： 天冬氨酸转移酶(AST) Bing氨酸转移酶(ALT) 、肌酸激酶(CK)、 乳酸脱氢酶(LDH) 、血肌酐（CR）、血尿素氮(BUN)  、TNF-α、IL-6、etc.^[1,2,3]；

4. 组织病理损伤检测 通过肺、肝、肾组织石蜡切片进行糖原/HE.染色，可以观察组织病理损伤的情况。例如，盲肠结扎穿刺法构建的脓毒血症大鼠模型会发现肾小管上皮细胞膨胀、刷状缘缺失、空泡变性、坏死、管型形成和细胞脱落等病理改变^[1,2,3]。

多方面的指标检测有助于评估脓毒症大鼠的病理生理状态、严重程度和模型的有效性。

1.Mitchell PS, Parkin RK, Kroh EM, Fritz BR, Wyman SK, Tewari M et al.Circulating microRNAs as stable blood-based markers for cancer detection. Proc Natl Acad Sci. 2008; 105: 10513-8.

2. Xiao B, Wang Y, Li W, Baker M, Guo J, He YW. Plasma microRNA signature

as a non-invasive biomarker for acute graft-versus-host disease. Blood. 2013;

122: 3365.

3. Yamaguchi T, Izumi Y, Nakamura Y, Yamazaki T, Shiota M, Iwao H. Repeated remote ischemic conditioning attenuates left ventricular remodeling via exosome-mediated intercellular communication on chronic heart failure after myocardial infarction. Int J Cardiol. 2015; 178: 239-46