軟瓊脂克隆形成服務(wù)實驗步驟

1.獲取樣本，培養(yǎng)細(xì)胞，

2.調(diào)整細(xì)胞懸液密度為1x103個/ml細(xì)胞。

3.制備底層瓊脂，溶化的5%瓊脂和 37℃ 左右預(yù)溫的新鮮培養(yǎng)液以1:9比例在 40℃ 均勻混合，加入培養(yǎng)皿(直

徑 60mm)中，每皿含0.5%瓊脂培養(yǎng)基2ml，室溫下瓊脂凝固。

4.制備上層瓊脂 37℃ 密度每川含200個的細(xì)胞懸液1.5ml移入小燒杯中，加入 40℃、5%瓊脂等體積混勻，即成0.25%半固體瓊脂培養(yǎng)基。配好的半固體瓊脂培養(yǎng)其立即加入鋪有底層瓊脂的培養(yǎng)用中，率溫下瓊脂凝固。37℃，5%CO2靜罟培養(yǎng)2-3周。

5.當(dāng)培養(yǎng)血中出現(xiàn)肉眼可見克降時，終止培養(yǎng)，棄去培養(yǎng)液，PBS液小心浸洗2次，空氣干燥，甲醇固定15分鐘，棄甲醇空氣干燥，用Giemsa染液染色10分鐘，流水緩慍洗去邊液，空氣干燥。

軟瓊脂克隆形成服務(wù):伊萊博生物擁有專業(yè)的技術(shù)支持和實驗操作人員團(tuán)隊，核心成員來自中科院、復(fù)旦、交大、同濟(jì)等國內(nèi)重點高校及科研機構(gòu)，能夠提供前沿的、完善的實驗技術(shù)咨詢與服務(wù)。為了響應(yīng)國家大力發(fā)展基礎(chǔ)研究的號召，推動實驗科學(xué)領(lǐng)域的進(jìn)步，伊萊博生物充分利用積累多年的科研資源優(yōu)勢，為廣大科研工作者提供實驗技術(shù)培訓(xùn)服務(wù)，從理論和實操兩個部分，培養(yǎng)其科研思維以及解決問題的能力，為今后的科研工作奠定堅實的基礎(chǔ)。