細(xì)胞實(shí)驗(yàn)步驟：

一、細(xì)胞復(fù)蘇

1.將10ml移液管、移液槍、1ml槍頭、50ml離心管、T25培養(yǎng)瓶、酒精燈、廢液缸等物品放入超凈工作臺，紫外燈照射30min后再通風(fēng)30min；

2.預(yù)熱培養(yǎng)基；

3.用75%酒精消毒后放入超凈工作臺；

4.將凍存細(xì)胞從液氮罐中取出；

5.放入一次性手套于37℃水浴鍋中快速晃動使其融化；

6.用75%酒精消毒后放入超凈工作臺；

7.吸取9ml培養(yǎng)基到50ml離心管中；

8.用1ml槍頭吸取解凍的細(xì)胞懸液于離心管中；

9.1000r/min,離心5min；

10.用75%酒精消毒后放入超凈工作臺；

11.吸棄上清液；

12.吸取1ml培養(yǎng)基重懸細(xì)胞，將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到培養(yǎng)瓶內(nèi)，補(bǔ)加適量培養(yǎng)基，輕輕晃動培養(yǎng)瓶使細(xì)胞分布均勻，并做好標(biāo)記；

13.在顯微鏡下觀察復(fù)蘇的細(xì)胞密度及狀態(tài)；

14.將細(xì)胞放回二氧化碳培養(yǎng)箱中靜置培養(yǎng)。

商品屬性：

產(chǎn)品介紹

大鼠毛囊干細(xì)胞永生化 細(xì)胞培養(yǎng)基由團(tuán)隊(duì)精心優(yōu)化，經(jīng)過長期測試，本產(chǎn)品可保持 大鼠毛囊干細(xì)胞永生化優(yōu)良的生長狀態(tài)。

本產(chǎn)品中已包含大鼠毛囊干細(xì)胞永生化細(xì)胞生長所需的各種成分，無需添加任何成分，可直接用于 大鼠毛囊干細(xì)胞永生化 細(xì)胞的培養(yǎng)。

上皮細(xì)胞培養(yǎng)體系   500ml

產(chǎn)品主要成分

上皮細(xì)胞基礎(chǔ)培養(yǎng)基                                       480 ml

運(yùn)輸和保存

運(yùn)輸：放置于含有生物冰袋的保溫箱中低溫運(yùn)輸

保存方法：2℃～8℃，避光，保存2個(gè)月；?

注意事項(xiàng)：

僅限科研用。

培養(yǎng)體系中的一些組分是對人體健康有害的物質(zhì)，請不要用暴露的皮膚接觸培養(yǎng)體系的液體和有培養(yǎng)體系的液體殘留的容器內(nèi)部；這部分有害物質(zhì)的濃度和危害性都較低，如有接觸，立即用自來水沖洗即可。

細(xì)胞培養(yǎng)步驟：

?細(xì)胞復(fù)蘇?：

從液氮罐中取出凍存細(xì)胞，迅速放入37℃水浴中解凍。

解凍后，將細(xì)胞轉(zhuǎn)移到含有新鮮培養(yǎng)基的培養(yǎng)皿中，輕輕搖動使細(xì)胞均勻分布。

放入37℃、5%CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。

?細(xì)胞換液?：

吸除或倒掉培養(yǎng)皿內(nèi)的舊培養(yǎng)液。

加入PBS緩沖液，輕輕漂洗細(xì)胞，以去除懸浮在細(xì)胞表面的碎片，重復(fù)幾次。

加入新的培養(yǎng)基。

?細(xì)胞傳代?：

當(dāng)細(xì)胞長到80%~90%時(shí)，進(jìn)行傳代。

吸除或倒掉瓶內(nèi)舊培養(yǎng)液，加入PBS緩沖液漂洗。

加入消化液，輕輕搖動使消化液流遍所有細(xì)胞表面。

將培養(yǎng)瓶放入37℃培養(yǎng)箱中靜止幾分鐘，觀察細(xì)胞變化。當(dāng)細(xì)胞間隙增大后，加入含有血清的培養(yǎng)液終止消化。

吹打細(xì)胞使其成為懸液，轉(zhuǎn)移到離心管中離心。

棄上清，加入適量的細(xì)胞培養(yǎng)液重懸細(xì)胞。

按比例分裝到新的培養(yǎng)皿中，補(bǔ)加新鮮培養(yǎng)基。

做好標(biāo)記，放入37℃、5%CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。

?細(xì)胞凍存?：

選擇對數(shù)生長期的細(xì)胞進(jìn)行凍存。

將細(xì)胞轉(zhuǎn)移到離心管中離心，棄上清。

加入適量的凍存液（如90%的培養(yǎng)基+10%的DMSO），輕輕吹打重懸細(xì)胞。

將細(xì)胞轉(zhuǎn)移到冷凍保存管中，標(biāo)記后放入程序降溫盒，再放入-80℃冰箱凍存。幾小時(shí)后或過夜轉(zhuǎn)至液氮罐保存。

公司正在出售的產(chǎn)品：

小鼠標(biāo)志物(CA724)ELISA 試劑盒

Human ai myocardial aibody (EMAb) ELISA Kit 人抗眼肌抗體(EMAb)試劑盒

HumanglathioneS-ansferases,GSTsELISAKit 人S轉(zhuǎn)移酶(GSTs)試劑盒 進(jìn)口分裝

CLIAKitforABM-Ab(Humanalveolibasememembranezoneaibody)ELISAKit人抗肺泡基底膜抗體

伊紅復(fù)染試劑盒50次

Mouseniicoxide,NOELISAKit小鼠(NO)試劑盒

大鼠氧鯊烯環(huán)化酶(OSC)試劑盒 ，英文名： OSC ELISA Kit

Mouse gelsolin (Gelsolin) ELISA Kit 小鼠凝溶膠蛋白(Gelsolin)試劑盒

MouseCiliaryNeuroophicFactor,CFELISAKit 小鼠睫狀神經(jīng)營養(yǎng)因子(CF)試劑盒 進(jìn)口分裝

CLIAKitforHumanComplemefragme5a,C5aELISAKit人補(bǔ)體片斷5a

細(xì)胞CaMKII激酶活性定量試劑盒(A/B/C)20次

ELISAKitOPG大鼠骨保護(hù)素

小鼠乙型肝e抗體(HBeAb)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

小鼠乙型肝e抗原(HBeAg)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

小鼠乙型肝表面抗體(HBsAb)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

小鼠氧化酶(DAO)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

(II)重鏈抗體

豬霍亂沙門氏菌抗體

CA4重組小鼠 Carbonic Anhydrase IV / Car4 蛋白 Protein

CCL12/MCP-5(C-C motif chemokine 12 0.5mgCCL12/MCP-5(C-C motif chemokine 12) 單核細(xì)胞趨化蛋白5抗原

UBE2M重組人 UBE2M 蛋白 Protein

FST Protein Human 重組人 Follistatin / FST (FS288) 蛋白

CD8A Protein Rat 重組大鼠 CD8A / Lyt2 蛋白 (Fc 標(biāo)屬

大鼠毛囊干細(xì)胞永生化細(xì)胞細(xì)胞專用培養(yǎng)基IDE 胰島素降解酶(抗原 0.5mgIDE 胰島素降解酶(抗原)

GIF Protein Human 重組人 Gastric intrinsic factor / GIF 蛋白

SELP重組食蟹猴 / 恒河猴 SELP / selectin P / P-selectin 蛋白 Protein

KLRB1F Protein Mouse 重組小鼠 KLRB1F / NKR-P1F 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)

BTK重組人 Bruton Tyrosine Kinase / BTK Kinase 蛋白 Protein